[实用新型]胶体金层析法抗Sp100抗体检测试纸

说明书

技术领域

本实用新型属于医学免疫应用领域，具体涉及到利用胶体金免疫层析技术检测抗Sp100抗体的试纸。 

背景技术

在PBC患者体内可检出多种自身抗体，如抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒体抗体(LKM-1)抗可溶性酸性核蛋白(Sp100)抗体、抗核膜糖蛋白(Gp210)抗体、抗早幼粒细胞白血病蛋白(PML)、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗体等，其中最主要的抗体是AMA，PBC常伴有高滴度的AMA，病程早期就出现AMA是本病的特点。 

AMA于1965年由WalRer等在PBC患者血清中用间接免疫荧光法首次发现，其后的研究显示，PBC患者的AMA阳性率可高达90％，此项检测已成为PBC诊断的主要检查项目。(Neuberger J，Thomson R.PBC and AMA -what is the connection[J].Hepatology，1999，29(1)265：271)其AMA-M2在PBC中敏感性可达90％以上，仍有10％AMA-M2阴性的PBC患者需其他的免疫学指标来对这部分患者进行检出([1]高荣凯.原发性胆汁肝硬化临床分析.[J].中国实用医药.2009，4(1)：116-117.)。 

除AMA外，一部分患者血清中也存在ANA，血清抗核抗体(ANA)阳性的PBC患者大约占50％左右。PBC患者常见的ANA免疫荧光有细胞核斑型、多核点型、核膜型、着丝点型、核仁型。多核点型和核膜型ANA对PBC患者有较高的特异性，可作为AMA阴性患者诊断PBC血清学指标。(Luettig B，Boeker K H，Schoessler W，et al.The antinuclear autoantibodies Sp100and gp210persist after orthotopic liver transplantation in patients with primary biliary cirrhosis[J].J Hepatol，1998，28(5)：824-828)，其中多核点型的免疫荧光模式，是在除核仁以外的整个细胞核中出现3～20个不同大小的点(大小13～ 110μm)。 

Sp100和早幼粒细胞白血病蛋白(PML)均产生多核点型免疫荧光模式，它们定位于核体结构中，为PBC特异性自身抗体的靶抗原。抗Sp100抗体的检出可避免对AMA阴性PBC患者诊断的遗漏和延误。(邵杰，魏来，王豪，等.原发性胆汁性肝硬化患者中多核点型抗核抗体的检测.[J].世界华人消化杂志，2005，13(12)：1478-1481.)抗Sp100抗体是PBC特异性自身抗体，其特异性几乎为100％。(刘妍，闫惠平，檀玉芬等.原发性胆汁性肝硬化患者抗Sp100抗体与核点型抗核抗体的检测.[J].临床检验杂志2009，27(4)：256-258.) 

Sp100蛋白和PML蛋白共同定位于核点(也称核体)，被称为核点蛋白，二者与PBC患者血清反应呈现相似的荧光表现一核点型，但二者是完全不同的抗原分子。它们的功能尚不清楚，但其结构包括一个锌指结构和可能具有调节活性的DNA结合域，Sp100还有类似于MHC-I抗原结合部位保守区域的序列。 

核点蛋白在核上的表达受病毒感染、干扰素等因素的影响。最初的免疫印迹方法表明Sp100抗原是分子量100KD左右的分子，但通过克隆表达得到的是一个编码480个氨基酸组成，分子量为53KD的分子，因其在凝胶电泳时表现为100KD的反常的迁移率，故命名为Sp100。通过基因片段噬菌体展示肽库技术分析Sp100的主要线性表位是296-311及332-351两个区域，反应核心分别是SNSKVE/EPLEVFISA。 

抗Sp100抗体在免疫荧光方法中常表现为多核点型(multiple nuclear dots，MND)，即间期细胞可见3～20多个点状颗粒，大小不同且分布在整个细胞核，胞浆无荧光，易误为抗着丝点抗体(ACA)，但ACA可使分裂期细胞染色体着色呈现典型表现，其颗粒数目较恒定，且大小均匀。