[实用新型]检测原发性肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶用试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种用于原发性肝癌检测的试剂盒，特别涉及一种检测原发性肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶用试剂盒。

背景技术

目前在原发性肝癌(PHC)的实验室诊断方面多以甲胎蛋白(AFP)为特异性指标。目前，临床较为公认的用AFP诊断PHC的标准为：AFP＞400ng/ml，影像学发现肝脏有实质性占位性病灶且能排除肝炎活动、生殖胚胎性肿瘤等。但在临床上，部分PHC患者血清AFP阴性或轻度升高，仅靠AFP诊断PHC的灵敏度不足70％，因此，对于AFP阴性或轻度升高的PHC的诊断仍是临床上亟待解决的问题。

作为PHC的辅助诊断指标，γ-谷氨酰转移酶(GGT)虽在大多数PHC中显著升高，但是临床应用的特异性不高。GGT同工酶诊断PHC虽具有较高的特异性，但是操作繁琐、费时，极大的限制了其在临床中的应用。所以除AFP外，目前仍需探索在诊断PHC方面特异性好、灵敏度高且操作方便的方法。

发明内容：

为了探索现有技术存在的诊断PHC的特异性不够好、操作繁琐的缺点，本实用新型公开了一种检测原发性肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶用试剂盒，具有较好的特异性和灵敏度，操作简便。

本实用新型的技术方案为：一种检测原发性肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶用试剂盒，所述试剂盒由盒体和盒盖组成，盒体内设有9瓶试剂，分别为DSA-GGT标准品1瓶、1∶100生物素标记的DSA-GGT单抗1瓶、1∶100链霉亲和素-辣根过氧化物酶1瓶、标准品和标本用稀释液1瓶、生物素化抗体稀释液1瓶、酶结合物稀释液1瓶、浓缩洗涤液1瓶、TMB显色剂1瓶、终止剂1瓶，另外还有封口膜、若干包被板条和一个包被板条支架，包被板条活动设于包被板条支架上。

所述包被板条为矩形板，板上设有12个盛液孔。

检测原理：

γ-谷氨酰转移酶广泛存在于人体的肾、胰、肝、脾和小肠组织中，以肾的含量最为丰富，而血清中的GGT主要来自于肝脏。当患者为PHC患者时，患者的GGT会出现大幅的升高，这一现象主要是有肝癌细胞返祖产生胚胎性GGT所致。胚胎性GGT分子与正常人的肝细胞所产生的GGT的差别并不在蛋白质一级的结构上，而是在该酶的糖链分子结构上。所以通过先从肝癌组织中分离纯化GGT，用欧曼陀罗凝集素(DSA)-Sepharose4B进行亲和层析分离纯化，获得与该凝集素强结合的GGT(DSA-GGT)，然后应用单克隆技术制备单克隆抗体(McAb)，建立其生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附(ELISA)检测方法，本实用新型的试剂盒就是基于此基础上制备得到。

有益效果：

1.PHC患者的DSA-GGT诊断的灵敏度可以达到65.5％，特异度达到91.1％。DSA-GGT为诊断PHC较为敏感的实验室指标。

2.操作简便。

附图说明

图1为本实用新型试剂盒打开状态下的俯视图。

图2为本实用新型的包被板条支架和包被板条俯视图。

具体实施方式：

一种检测原发性肝癌特异性γ-谷氨酰转移酶用试剂盒，所述试剂盒由盒体1和盒盖组成，盒体1内设有9瓶试剂5，分别为DSA-GGT标准品1瓶、1∶100生物素标记的DSA-GGT单抗1瓶、1∶100链霉亲和素-辣根过氧化物酶1瓶、标准品和标本用稀释液1瓶、生物素化抗体稀释液1瓶、酶结合物稀释液1瓶、浓缩洗涤液1瓶、TMB显色剂1瓶、终止剂1瓶，另外还有封口膜3、若干包被板条4和一个包被板条支架2，包被板条4活动设于包被板条支架2。所述包被板条4为矩形板，板上设有12个盛液孔。包被板条4和包被板条支架2均为PP或是PE制成，包被板条支架2的形状与包被板条4的形状相适应，包被板条4活动设于包被板条支架2上。试剂盒中的各个试剂瓶的瓶盖颜色可以设置的不同，以示区分。

具体使用方法为：将标本或是DSA-GGT标准品以标准品和标本用稀释液稀释到合适浓度，洗涤液以浓缩洗涤液按要求配制，1∶100生物素标记的DSA-GGT单抗以生物素化抗体稀释液稀释到合适浓度，1∶100链霉亲和素-辣根过氧化物酶以酶结合物稀释液稀释到合适浓度得到酶结合物工作液。