[实用新型]一种检测猪尿中沙丁胺醇的免疫胶体金试剂板

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种检测沙丁胺醇的试剂板，具体涉及一种检测猪尿中沙丁胺醇的免疫胶体金试剂板。 

背景技术

沙丁胺醇(Salbutamol，Sal)，属于β-兴奋剂类药物，是“瘦肉精”的一种。临床上广泛用于治疗支气管哮喘，同时沙丁胺醇还可作为牛、羊、禽、猪等畜禽的促生长剂。但是，由于该类药物具有致人心悸、头疼、目眩、恶心甚至损害肝肾等副作用，而且易在动物脏器中积聚残留，并可通过食物链进人人体，严重危害人类键康。所以，欧盟、美国、中国等国家和地区都先后立法禁止在畜禽生产中使用此类药物。然而，受经济利益驱动以及缺乏有效的监测手段，目前，养殖领域仍存在β-兴奋剂类药物的非法使用现象，因此，建立科学、规范的药残监控方法十分必要。 

针对β-兴奋剂类药物的检测方法如气一质联用法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)以及液一质联用法(LC-MS)等，具有准确可靠、重复性强等有点，但是这些方法的缺点同样突出，如仪器昂贵、操作复杂、便携性差等，因而不利于大范围的推广应用及高通量检测。 

基于抗原抗体特异性反应建立起来的免疫学测定方法灵敏度较高，特异性强，试样预处理简单，分析时间短，使用方便。因此，在现场监控和基层的大规模筛选检测中，免疫学检测方法更实际。 

胶体金免疫层析法是在免疫渗滤技术的基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术。该方法将反应所需要的原料的全部或大部分均已整合到试剂中，反应通常只需数分钟，测试结果以肉眼可见的显色条带来判断。具有简便快速、操作简单、特异性强、不需要额外设备等优点。 

实用新型内容

本实用新型针对检测需求，研制开发一种检测限符合要求，重现性好，检测时间短，适合现场快速检测，技术产品或仪器设备成本较低，运行费用低的快速检测试剂板。 

本实用新型试剂板应用层析式抗体免疫竞争原理，通过抗原和金标抗体反应显色，特异性检测猪尿中的沙丁胺醇残留水平。如果样品溶液中含有沙丁胺醇残留，沙丁胺醇先和胶体金颗粒上的抗体反应，因此当胶体金颗粒随样品溶液扩散至检测线时，胶体金颗粒上抗体的活性位点因被样品溶液中的沙丁胺醇药物占据而无法与检测线上沙丁胺醇特异性抗原结合；当样品中的沙丁胺醇含量超过试剂板检出限时，试剂板上的检测线无显色，判定为阳性。反之，当样品中沙丁胺醇含量在试剂板检出限以下或无残留时，试剂板上的检测线显色，判定为阴性。 

本实用新型试剂板由上下两块塑料模板和背衬组成，背衬上依次紧密粘贴着样品垫、胶 体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。相邻各部分间有1-2mm的重叠以保证层析作用从样品垫到吸水垫部位的顺利进行。 

胶体金结合垫上包被有抗沙丁胺醇单克隆抗体与胶体金的结合物；硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次包被有沙丁胺醇-载体蛋白偶联物和羊抗鼠IgG，分别作为检测线和控制线。偶联沙丁胺醇的载体蛋白可为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白等。 

本实用新型试剂板的各部分组成成分和功能如下： 

塑料模板，起固定背衬和标示各功能区(加样孔、检测区、控制区)的作用。 

背衬，由一面涂有不干胶的不吸水韧性材料制成，起固定支撑试剂板其他组成部分的作用。 

样品垫，由玻璃纤维制成，起吸收样品溶液和缓冲样品溶液pH值的作用。 

胶体金结合垫，由聚酯膜制成，其上有抗沙丁胺醇单克隆抗体与胶体金颗粒的结合物，为样品溶液中有效成分和金标抗体反应提供场所。 

硝酸纤维素膜，从样品垫到吸水垫方向上依次喷有检测线和控制线，将反应结果以肉眼可见的颜色表征出来。 

吸水垫，由滤纸制成，将反应过程中多余的溶液吸收。 

本实用新型试剂板具有如下有益效果： 

(1)特异性好。本实用新型试剂板对沙丁胺醇的交叉反应率为100％，对如盐酸克伦特罗、莱克多巴胺等β-兴奋剂类药物的交叉反应率均低于1％。可见，本实用新型试剂板对沙丁胺醇反应具有高度专一性。 

(2)灵敏度高。本实用新型试剂板对猪尿样品中沙丁胺醇的检出限为5.0ppb，适用于各类企业及检测机构。

(3)操作简单快捷。本实用新型试剂板将反应所需的大部分原料整合到PVC背衬中，滴样后，抗原抗体反应在固相膜上快速进行，大大缩短检样时间，且样品无需特殊处理，滴样后3-5分钟即可用肉眼通过判断硝酸纤维素膜上的检测线和控制线的颜色深浅读取结果。检测实施过程不依赖任何实验设备，普通人员均可操作，不需专业培训。