[实用新型]实验动物多项病毒的简易蛋白芯片定性检测试剂盒有效
申请号: | 201120514744.7 | 申请日: | 2011-12-12 |
公开(公告)号: | CN202393770U | 公开(公告)日: | 2012-08-22 |
发明(设计)人: | 荣荣;时长军;郭连香 | 申请(专利权)人: | 苏州西山生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 董建林;严志平 |
地址: | 215125 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 实验 动物 多项 病毒 简易 蛋白 芯片 定性 检测 试剂盒 | ||
技术领域
本实用新型涉及一种病毒抗体定性检测的蛋白芯片试剂盒,具体涉及一种检测实验动物多项病毒的简易蛋白芯片定性试剂盒。
背景技术
灵长类实验动物是研究病毒感染性疾病、神经系统疾病及肿瘤等疾病和新药研发所必需的重要动物模型。随着研究的深入,对灵长类实验动物的需求量及其品质的要求也不断提高。我国科技部已经制定实验动物健康标准,明确要求普通级动物必须是B病毒(BV)阴性,SPF级动物必须是B病毒(BV)、猴T细胞趋向性病毒(STLV)、猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D病毒(SRV)等阴性。国内外用动物单位根据其研究内容的不同也对麻疹病毒、埃博拉病毒、猴泡沫病毒等多种病毒有要求,但因为缺乏可靠的检测方法,灵长类实验动物健康检测远远跟不上行业发展的需要,因此,提供一种灵敏度高、特异性强、检测速度快、效率高的动物病毒检测方法已成为必然的需求。现有的检测方法主要是玻片法和ELISA方法,该两种方法一次只能检测出一种病毒抗体,操作繁琐,检测的速度慢、效率低。
实用新型内容
为解决现有技术的不足,本实用新型的目的在于提供一种灵敏度高、特异性强、检测速度快、效率高的检测实验动物多项病毒的简易蛋白芯片定性试剂盒。
为达到上述目的,本实用新型是通过以下的技术方案来实现的:
实验动物多项病毒的简易蛋白芯片定性检测试剂盒,其特征在于,包括按矩阵预点了多种病毒抗原及参照细胞的芯片膜、用于加样的载样条、渗滤用的渗滤垫和反应的塑料平皿,所述的载样条贴覆在所述的芯片膜上按矩阵排列的每组抗原点上,且所述的载样条的尺寸与每组抗原点的尺寸相匹配。
进一步,所述的芯片膜的基质为孔径0.45um的硝酸纤维膜,大小为9cm*9cm,且硝酸纤维膜上共预点3列,每列9组,共27组,其中前25组检测样本,最后两组分别为阴性对照和阳性对照,每组可以点布约7种抗原,包括病毒抗原及参照细胞,在每组病毒抗原点的两端,各有一个用于定位的甲基紫点,每个点的量为0.5-1ul,直径约2mm。
此外,所述的硝酸纤维膜所预点的抗原为实验猴易感的B病毒(BV)、猴T细胞趋向性病毒(STLV)、猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D病毒(SRV)、麻疹病毒(Measles)、埃博拉病毒(Ebola)、猴痘病毒(MPV)中的至少一种病毒。
而所述的载样条是尺寸为0.5cm*2cm,厚度为0.18mm的滤纸条。
还包括用于血清样本渗滤而放在芯片膜下方的渗滤垫,所述的渗滤垫是大小为9cm*9cm的厚滤纸。
此外,还包括碱性磷酸酶标记的羊抗猴IgG、显示试剂快红和萘酚和用于将硝酸纤维膜成像的成像仪。
本实用新型是将浸透了稀释血清的载样条按顺序贴覆在抗原膜矩阵上,经过孵育、洗涤后,加入适量的碱性磷酸酶标记的羊抗猴IgG进行二次孵育,再次洗涤后加入显色剂快红和萘酚进行显色,通过抗原点是否显色来判读结果。通过成像仪将膜成像,再经过软件的处理和分析,可以对结果做定量分析。
本实用新型的有益效果是:本实用新型提供的实验动物多项病毒的简易蛋白芯片定性检测试剂盒,可在两小时内一次性同时检测B病毒、STLV、SIV、SRV、麻疹等多种病毒的抗体,一张9cm*9cm的芯片膜能同时检测25份样本,每次实验可以同时操作若干张芯片膜,实现了多份样本的多种病毒同步检测,即大大提高了检测的速度和效率又减少了每个标本的采样量。硝酸纤维膜比传统的固相载体能吸附更多的抗原,大大提高了检测敏感性,利用本实用新型的检测方法简易,不需要特殊设备,便于在各级动物中心和养殖单位推广使用,同时还具有稳定性高、重复性好,特异性好的优点,芯片膜还可以批量加工,且易于保存。
附图说明
图1是猴病毒抗体检测芯片示意图;
图2是染色深度和读膜参照示意图。
图中主要附图标记含义为:
a、芯片膜 b、病毒抗原组 c、阴性对照组
d、阳性对照组 e、甲基紫点。
具体实施方式
图1是猴病毒抗体检测芯片示意图。
如图1所示:实验动物多项病毒的简易蛋白芯片定性检测试剂盒,包括按矩阵预点了多种病毒抗原及参照细胞的芯片膜a、用于加样的载样条、渗滤垫和反应的塑料平皿,所述的载样条贴覆在所述的芯片膜a上按矩阵排列的每组抗原点上,且所述的载样条的尺寸与每组抗原点的尺寸相匹配,在本实施方式中,所述的载样条的尺寸为0.5cm*2cm,厚度为0.18mm。
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