[发明专利]用于预防和治疗炎症性肠病(IBD)和肠易激综合征(IBS)的重组益生菌

说明书

发明领域：

本发明涉及以下疾病的一般治疗领域：如炎症性肠病(IBD)的消化道炎症性疾病、如囊性纤维化和支气管肺慢性阻塞性疾病(BPCO)的肺部疾病、炎症性关节疾病(诸如骨关节炎)、炎症性泌尿生殖系统疾病，以及如肠易激综合征(IBS)的与慢性内脏疼痛症状相关的疾病。

发明背景：

治疗如IBD的慢性炎症性病症是重大的医学挑战，因为这些病症折磨着数百万人。其在发达国家中的发病率最高并且在过去三十年内不断增加。目前的IBD疗法强烈需要得到改进，高比例(20与40%之间)的患者对于任何形式的治疗都有抗药性，严重的副作用和较高的成本也与目前可利用的药物(糖皮质激素和单克隆抗体疗法)相关。另外，涉及IBD发病的机制尚未完全得到了解，并且用于IBD的更有效治疗或甚至治愈方法的开发取决于对炎症性反应进行调控的更好了解。一些研究已经证明蛋白酶在维持胃肠道(GIT)的慢性炎症性反应中的关键作用[Vergnolle,N.2005；Cenac,N.等,2007;Hyun,E.等,2008；Vergnolle,N.等,2004]。因此，内源性蛋白酶抑制剂对于控制肠道炎症性反应似乎是关键性的。

基于这方面的知识，本发明人提出：递送那些蛋白酶抑制剂至GIT中可用于治疗IBD和/或肠易激综合征(IBS)。

使用益生菌来治疗IBD现在已被提出了好几年，并且不同的研究已经报导经过单独或组合测试的这些益生菌的一些有益效果[Hedin,C.等,2007；Sartor,R.B.2004]。在粘膜层面，使用重组非病原性食品级细菌作为消炎分子的递送载体的策略已经用于递送消炎细胞因子IL-10[Steidler,L.等,2000]。I期临床试验已经证明，口服给予的表达IL-10细胞因子的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)菌株是安全的，因为在那些患者中未发生严重的副作用[Braat,H.等,2006]。然而，在用IL-10重组乳酸乳球菌治疗的克罗恩氏病(Crohn’s disease)患者中疾病活性的降低在某种程度上是有限的。这种有限的效力可由以下事实来解释：报导总是指出IL-10递送对于结肠炎的发病仅具有零散的有益效果[Braat,H.等,2003]。因此，对待由乳酸乳球菌递送的消炎分子的性质的较好选择可大大改善治疗效力。在本文中，本发明人提出使用食品级细菌来表达抗蛋白酶trappin-2并将其递送至消化道中。

发明概述：

本发明是基于以下发现：与现有治疗相比，使用食品级细菌来递送如trappin-2的消炎分子可提供安全性和更好的效率。因此，本发明涉及选自以下的分子：trappin-2蛋白质或trappin-2蛋白质的活性部分、WAP家族蛋白质成员或WAP家族蛋白质成员的活性部分，或丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)家族蛋白质成员或丝氨酸蛋白酶抑制剂家族蛋白质成员的活性部分，所述分子是用于治疗肠易激综合征(IBS)。

本发明的另一目标涉及重组食品级细菌，其包含选自以下的基因：编码trappin-2蛋白质或trappin-2蛋白质的活性部分的基因、编码WAP家族蛋白质成员或WAP家族蛋白质成员的活性部分的基因，或编码丝氨酸蛋白酶抑制剂家族蛋白质成员或丝氨酸蛋白酶抑制剂家族蛋白质成员的活性部分的基因。

本发明的另一个方面涉及包含如上文定义的重组食品级细菌的治疗组合物。

发明详述：

定义：

如本文所使用，WAP家族的术语“trappin-2”(又称为抑弹性酶蛋白、抑弹性酶蛋白特异性抑制剂(ESI)或SKALP，即皮肤抗白细胞蛋白酶)表示在呼吸道中分泌的HNE(人中性粒细胞弹性蛋白酶)和蛋白酶3的低分子量(9.9kDa)抑制剂[Sallenave等，1991和1993]。trappin-2与(A1-Pi)和SLPI一起构成肺中的‘抗弹性蛋白酶防护’的完整部分。人trappin-2基因的示例性序列以入藏登记号S58717寄存在数据库Genbank中。

如本文所使用，用于“乳清酸性蛋白质”的术语“WAP家族”表示含有trappin-2和ps20的蛋白质家族。