[发明专利]前胃泌素和肝病理

说明书

1.对相关申请的交叉参考

本申请要求在2010年1月8日提交的美国临时申请号61/293,557的优先权，将所述临时申请的内容完整并入本文作为参考。

2.对序列表的参考

序列表随同本文同时提交。

3.背景

本公开提供用于诊断和筛选肝病理，包括肝增生或者退化疾病的方法和材料；并且更特别地，提供用于定量或测定前胃泌素水平的方法和材料来诊断肝病理。

3.1.胃泌素和前胃泌素的背景

胃泌素是肠肽激素，其作为胃酸分泌的刺激剂行使功能。在成体哺乳动物中，它主要由胃窦的G细胞产生，并且在小肠上部和胰脏内产生的程度不同，在结肠内几乎没有可检测的量。最近，对在结肠直肠致癌作用中肽的胃泌素家族作用有越来越多的兴趣。特别地，有证据表明以前被认为是无活性的胃泌素的前体形式（前胃泌素和甘氨酸延伸的胃泌素），在结直肠癌的发展中起作用。

胃泌素基因被翻译成101个氨基酸的多肽，称作前胃泌素原，其包含信号序列（下划线），信号序列被切割，产生一个80个氨基酸的多肽：前胃泌素。依次地，前胃泌素被加工以便提供裂解产物G₃₄，其是相应于前胃泌素残基38至71的一个34个氨基酸的肽。然后G₃₄在它的羧基末端用甘氨酸残基延伸，产生甘氨酸延伸的胃泌素(G₃₄-Gly)。前胃泌素切割的副产物是6个氨基酸的肽，称作C末端侧翼肽或者CTFP，其在序列中对应于前胃泌素的残基55到72并且称作G₁₇-Gly。G₃₄-Gly和G₁₇-Gly的C-末端甘氨酸的去除，接着C－末端酰胺化，分别产生G₃₄和G₁₇，其都被C-末端酰胺化。

大部分前胃泌素的测定法不能区分前胃泌素和其他的胃泌素基因产物，导致全长的前胃泌素水平的不准确测量。因为前胃泌素水平在一种或者多种疾病中起作用，希望有用于测量前胃泌素的准确方法。

3.2.肝病理背景

许多肝病理是很难诊断的。例如，通过常规的血液测试不能诊断肝癌。通常需要医生用肿瘤标记甲胎蛋白（AFP）筛查。然而，升高的AFP不是对肝癌特异的。在成人中，在三种情况下：肝癌、生殖细胞肿瘤（睾丸和卵巢的癌症）、肝的转移癌（起源于其他器官的癌症）可见高血液水平(超过500ng/mL)的AFP。此外，AFP对于肝癌的敏感性是约60%。换句话说，只有在约60%的肝癌患者中可见升高的AFP血液水平；40%的肝癌患者中具有正常的AFP水平。另一种难于诊断的肝病理是肝硬化，其是特征为肝斑痕形成和肝功能不全的慢性肝疾病的结果。诊断的金标准是通过肝的活组织检查，其是侵入性的技术。

丙型肝炎是一种由丙型肝炎病毒（HCV）引起的影响肝的传染病。这种感染通常是无症状的，但是一旦建立感染，慢性感染可以进展到肝的斑痕形成（纤维化）并且晚期斑痕形成（硬化）。通常通过血清学的筛选诊断丙型肝炎。将期望检测和/或证实丙型肝炎的其他手段。

因为肝癌、肝硬化和丙型肝炎的早期和准确检测具有增加患者存活率的可能，现在并且长期需要诊断或者检测这些病理的方法，所述病理包括患者患有超过一种或者全部上述疾病的的情况。

4.概述

已经发现尽管具有一种或者两种肝病理的患者可以显示出升高的人前胃泌素(hPG)水平，但是具有肝癌、丙型肝炎和肝硬化的患者显示极其升高的hPG水平，其超过具有这些病症的一种或者两种的患者显示出的hPG水平的仅仅相加的结果。基于本公开，患者的hPG血浆或血清水平可以用于为肝病理分配危险度系数。此外，hPG的过量的血清或者血浆水平可用于诊断患有肝癌、丙型肝炎和肝硬化的患者。

通过本公开的方法可以诊断的肝癌包括原发性肝癌（例如肝细胞癌，起源于肝的癌）和继发性肝癌。

本申请也提供了诊断方法，其中，如果检测到了高于阈值（例如，至少约400,450,500,550,600,650,700或者750pM)的人前胃泌素(hPG)水平，那么鉴定患者患有肝疾病。在具有比肝疾病平均发生率更高的群体中，例如，在吸毒者或者嗜酒者群体中或者居住在比肝疾病平均发生率更高的地理区域的人中，这种方法也可用作标准诊断。因此，也提供了在这些群体中检测升高的hPG水平的方法。