[发明专利]用于生物材料的澄清试剂和其用途

说明书

技术领域

本发明涉及用于使生物材料透明的澄清试剂(clearing reagent)和其用途。

背景技术

对于不透明组织的利用光学显微镜的内部观察来说，进行使用澄清试剂的预处理(用于使对象透明的澄清处理)。

作为澄清试剂和预处理方法的典型的例子，已经知道(i)在专利文献1和非专利文献1中由Ann-Shyn Chiang描述的Focus Clear(产品名称)溶液以及(ii)在非专利文献2中由Hans-Ulrich Dodt等人描述的组织澄清方法。这些都被用于使组织透明以用于对组织中存在的荧光物质的观察。

引用列表

[专利文献]

美国专利第6472216号(专利授权日：2002年10月29日)

[非专利文献]

非专利文献1

Ann-Shyn Chiang等人：Insect NMDA receptors mediate juvenile hormone biosynthesis.PNAS 99(1)，37-42(2002)。

非专利文献2

Hans-Ulrich Dodt等人：Ultramicroscopy：three-dimensional visualization of neuronal networks in the whole mouse brain.Nature Methods 4(4)，331-336(2007)。

发明概述

技术问题

Focus Clear溶液含有二甲亚砜(DMSO)和/或类似物作为用于使对象透明的活性组分，难以在活组织上使用。因此，可以对其应用Focus Clear溶液的对象主要地限于固定的样品。

此外，Focus Clear溶液具有非常复杂的组成，由此其制备是复杂的，并且其成本是非常高的。此外，虽然提出，Focus Clear溶液将允许使用荧光蛋白的观察，但是Focus Clear溶液使神经组织收缩并且不足以使在深的区域的神经组织的混浊澄清。

同时，Dodt等人的组织澄清方法实质上要求在用于使对象透明的步骤中使用大量的有机溶剂。因此，该方法也难以在活组织上使用，并且可以对其应用该方法的对象主要地限于固定的样品。

此外，如上文描述的，因为组织澄清方法实质上要求使用大量的有机溶剂，所以该方法破环几乎所有的荧光蛋白。因而，使用该方法，难以进行使用荧光蛋白的组织观察。

此外，上文描述的组织澄清方法涉及经历澄清处理的组织的脱水，这是由于它们的组成的本质。然而，该过程导致组织的不可逆收缩。

作出本发明以解决以上的问题，并且本发明的一个目的是提供：新颖的用于使生物材料透明的澄清剂，所述澄清剂含有作为活性组分的具有较高的生物亲和性的组分；以及其用途。

问题的解决方案

为了解决以上的问题，本发明的发明人进行了努力的研究，得到了新的发现，即在具有优良的生物亲和性的组分中，尿素具有使生物材料透明的能力。基于这一点，本发明的发明人得出本发明。

具体地，根据本发明的用于使生物材料透明的澄清试剂包含作为活性组分的选自由尿素和尿素衍生物组成的组的至少一种化合物，所述澄清试剂是溶液。

本发明还提供用于进行使生物材料透明的澄清处理的体系，该体系包含：上文的澄清试剂中的任何澄清试剂；以及已经被分离的生物材料，澄清试剂已经渗透入生物材料中以使生物材料透明。

根据本发明的用于使生物材料透明的方法包括以下步骤：使上文的澄清试剂中的任何澄清试剂渗透入已经被分离的生物材料中，目的是使生物材料被制成透明的。

根据本发明的用于复原已经通过澄清处理被制成透明的的生物材料的方法包括以下步骤：使平衡盐溶液渗透入已经根据上文的方法被制成透明的的生物材料中，目的是使生物材料恢复至生物材料在澄清处理之前具有的状态。

本发明还提供用于进行使生物材料透明的澄清处理的试剂盒，该试剂盒包括上文的澄清试剂中的任何澄清试剂。

本发明的有益效果

本发明提供：新颖的用于使生物材料透明的澄清试剂，该澄清试剂含有作为活性组分的具有较高的生物亲和性的组分；以及其用途。

附图简述

图1

图1关于本发明的实施例，是示出了用根据本发明的用于使生物材料透明的澄清试剂处理的小鼠海马体的视图。

图2