[发明专利]一种递送和采用异硫氰酸酯预防和/或治疗膀胱癌的新型方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请请求2010年3月11日提交的美国临时专利申请61/313,004的优先权，其内容通过引用纳入本文。

政府权利

本发明在国立癌症研究院提供的R01CA124627号政府资助下完成。政府对本发明享有一定的权利。

发明领域

本发明一般涉及癌症治疗的领域，并且更具体涉及异硫氰酸酯(ITC)治疗和/或预防膀胱癌的用途。

发明背景

在西方社会，膀胱癌在男性和女性中分别是第四和第八位最常见恶性肿瘤[1]，大部分（约80%）初始诊断为浅表性非浸润性肿瘤，对其进行经尿道切除术仍是首选疗法，而在复发风险高的情况中则再进行膀胱内免疫治疗或化疗。即使如此，几乎80％的患者会复发，约10％发展为更有侵略性的肌层浸润性肿瘤[2,3]。处于该病较高阶段的病人发展更频繁，其中三分之一死于该病。诊断出膀胱癌的年龄中值接近70岁(late 60s)[4]。顺铂联合化疗仍然是浸润性膀胱癌的主要疗法。在这种高龄下常见的肾功能障碍和性能不佳使得无法进行顺铂化疗，而所用的其他方案相对于顺铂联合化疗都不是最理想[5]。胆囊切除术和放疗与化疗经常伴有高发病率和死亡率[4]。因此，膀胱癌在治疗和处理上仍然是最昂贵的癌症之一。另外，大部分人膀胱癌检测为没有肌层浸润性的浅表性癌并用经尿道切除术治疗。因此，高复发危险的患者在手术后通过使用减毒卡介苗(BCG)的免疫疗法或化疗（例如丝裂霉素）来抑制复发。这些疗法不仅必须经过尿道递送来防止全身毒性作用，而且疗效有限并且局部副作用明显。另一方面，有可观比例的肌层浸润性膀胱癌患者先前没有发生浅表性疾病，并且，约50％的肌层浸润性膀胱癌患者在病情出现时已发生远距离转移[6]。尽管转移病例中初始应答率高达40-70%，但化疗的总存活率只有5-20%[5]。因此，对治疗以及预防膀胱癌，尤其是复发膀胱癌的方法一直有需求且未得到满足。

发明简述

本发明提供了治疗和/或预防膀胱癌的组合物和方法。该方法包括向诊断为、疑似患有、或有患膀胱癌风险的个体给予包括一种或多种ITC的组合物，以至该ITC的给予能够抑制膀胱癌的生长、肌层浸润和/或复发。该组合物包含各种ITC，包括但不限于含有ITC或其前体(硫代葡萄糖苷(glucosinolate))的蔬菜制品的各种混合物。

在一个实施方式中，本发明包括一种包含给予含ITC组合物的方法，其中所述ITC以含ITC的蔬菜制品的形式提供。该蔬菜制品包括但不限于：茎椰菜/茎椰菜芽提取物、茎椰菜种子粉、芥菜种子粉、辣根粗粉（meal）/粉末（powder）、山葵粉或其组合。在一个实施方式中，蔬菜制品包括茎椰菜种子。所述种子通过经受烘烤和加压热处理（例如高压蒸汽灭菌）来制备用于膀胱癌的治疗和/或预防。我们发现该方法可使表硫特异蛋白(epithiospecifier)（ESP）失活，这在经相应处理的种子与含黑芥子苷的产品（例如芥菜种子粉）混合时很有利。因此，在一个实施方式中，用于本发明的茎椰菜产品包含热/压力失活的ESP。这个独特的方法产生了适于优化递送异硫氰酸烯丙酯(AITC)和萝卜硫素(SF)两者的稳定产品。

本发明还提供了一种独特的给药方案，将含至少一种ITC的组合物以口服的方式给予个体并且优选在个体即将入睡的时候给予。该给药方案包括每日给予所述个体单份或多份无毒剂量的ITC并持续一段时间（至少几天）。

在各实施方式中，ITC是作为药物制品来提供的分离的和/或纯化的或合成的ITC。ITC的一些例子是AITC、异硫氰酸苄酯(BITC)、异硫氰酸苯乙酯(PEITC)和SF。在另一个实施方式中，ITC的衍生物和/或代谢物(包括谷胱苷肽偶联物、胱氨酰甘氨酸偶联物、半胱氨酸偶联物和N-乙酰半胱氨酸（NAC）偶联物)可单独或以各种组合给予。

附图简要说明

图1.AITC和SF的化学结构和推定的抗癌机制。箭头表示活化，符号T表示抑制。图中信息汇编自不同细胞系的已公开研究的集合。

图2.葡糖硫苷酶催化转化硫代葡萄糖苷为ITC以及ESP的干扰。

图3.AITC对细胞存活和增殖的作用。在人膀胱癌UM-UC-3细胞、大鼠膀胱癌AY-27细胞和正常的人膀胱上皮细胞(HUC)中以指定浓度来评估AITC。A.MTT试验测定的细胞生长抑制，AITC处理72小时。通过非线性回归曲线拟合计算IC50。B.流式细胞仪测定的细胞周期停滞(□,亚G1;G1;S;■,G2/M)，AITC处理24小时。均值±SE,n=3-6),*P<0.05。