[发明专利]荧光观察装置以及荧光观察方法

说明书

技术领域

本发明涉及荧光观察装置以及荧光观察方法。

背景技术

目前公知有将荧光图像除以反射光图像来校正由于观察距离而引起的荧光图像的亮度变动的方法（例如，参照专利文献1~专利文献3。）。

现有技术文献

专利文献

【专利文献1】日本特开昭62-247232号公报

【专利文献2】日本特公平3-58729号公报

【专利文献3】日本特开2006-175052号公报

发明内容

发明所要解决的课题

但是，在荧光与反射光中，因为摄像亮度对观察距离的依赖性不同，所以具有仅仅将荧光图像除以反射光图像无法完全校正距离影响这样的问题。

本发明是鉴于上述情况而作出的，其目的是提供可充分去除在除法运算后的图像中残存的对距离的依赖性并利用定量性高的荧光图像进行观察的荧光观察装置以及荧光观察方法。

用于解决问题的手段

为了达到上述目的，本发明提供以下的手段。

本发明的第1方式提供一种荧光观察装置，具备：照明部，其具有对被摄体照射照明光以及激励光的光源；荧光摄像部，其拍摄因来自该照明部的激励光的照射而在被摄体中产生的荧光，取得荧光图像；返回光摄像部，其拍摄因来自所述照明部的照明光的照射而从被摄体返回的返回光，取得参照图像；距离信息取得部，其取得该返回光摄像部与所述被摄体的距离信息；以及图像校正部，其采用所述返回光摄像部所取得的参照图像来校正所述荧光摄像部所拍摄的荧光图像，该图像校正部根据所述距离信息取得部所取得的距离信息来设定校正系数，并采用所设定的校正系数作为指数对所述参照图像或所述荧光图像中至少一方的光强度信息进行幂运算，由此生成校正用参照图像或校正用荧光图像，并将所述校正用荧光图像除以所生成的所述校正用参照图像。

根据本发明的第1方式，当从照明部对被摄体照射激励光时，激励在被摄体内存在的荧光物质并产生荧光。通过荧光摄像部对所产生的荧光进行摄影并取得荧光图像。另一方面，当从照明部对被摄体照射照明光时，通过返回光摄像部对在被摄体的表面上反射等后返回的返回光进行摄影并取得参照图像。在图像校正部中采用参照图像来校正所取得的荧光图像。

这里，所取得的荧光图像中的各个像素的强度信号以及参照图像的强度信号分别对距离具有依赖性，所以利用某指数对参照图像以及荧光图像的强度信号进行取幂，由此能够降低它们的依赖性。在此情况下，因为构成参照图像的照明光的反射光与构成荧光图像的荧光的路线不同，所以对距离的依赖性也依赖于距离而变动。在本发明的第1方式中，图像校正部将根据距离信息设定的校正系数作为指数来生成校正用参照图像或校正用荧光图像中的至少一方，所以即使观察距离变动较大，也能够获得高精度地对其进行校正的定量性高的荧光图像，能够进行准确的荧光观察。

在上述发明中，上述距离信息取得部可根据上述返回光取得部所取得的参照图像的信号强度来取得上述距离信息。

这样，无需采用特别的传感器就能够取得距离信息，获得定量性高的荧光图像。

在上述发明中，具有距离调节部，其使上述被摄体在近接或远离上述返回光摄像部的方向移动，上述距离信息取得部可以是上述距离调节部所具备的移动量传感器。

这样，可通过使被摄体移动的距离调节部具备的移动量传感器直接取得距离信息，来获得定量性高的荧光图像。

在上述发明中，上述图像校正部具有将上述距离信息与上述校正系数对应存储的校正系数存储部，可采用上述距离信息取得部所取得的距离信息来读出在上述校正系数存储部中存储的校正系数。

这样，能够针对距离信息迅速地设定可最优地校正参照光图像和/或荧光图像的校正系数。

本发明的第2方式提供一种荧光观察方法，其中，从照明部对被摄体照射照明光以及激励光，拍摄因来自该照明部的激励光的照射而在被摄体中产生的荧光，取得荧光图像，由返回光摄像部拍摄因来自所述照明部的照明光的照射而从被摄体返回的返回光，取得参照图像，取得该返回光摄像部与所述被摄体的距离信息，根据所取得的距离信息来设定校正系数，采用所设定的校正系数作为指数对所述参照图像或所述荧光图像中至少一方的光强度信息进行幂运算，由此生成校正用参照图像或校正用荧光图像，并将所述校正用荧光图像除以所生成的所述校正用参照图像

发明效果

本发明起到如下这样的效果：可充分去除在除法运算后的图像中残存的对距离的依赖性并利用定量性高的荧光图像来进行观察。

附图说明