[发明专利]无岩藻糖基化CD20抗体与mTOR抑制剂的联合疗法

说明书

本发明涉及无岩藻糖基化CD20抗体与mTOR抑制剂用于治疗癌症的联合疗法。

发明背景

无岩藻糖基化的抗体

单克隆抗体的细胞介导的效应器功能可以通过工程化改造其寡糖组分来增强，如记载于Umana,P.等,Nature Biotechnol.17(1999)176-180及US 6,602,684的。IgG1型抗体（即在癌症免疫疗法中最常使用的抗体）是在每个CH2域中的Asn297处具有保守的N连接的糖基化位点的糖蛋白。附着于Asn297的两个复合双触角寡糖掩埋于各CH2域间，与多肽主链形成广泛的接触，并且其存在对于抗体介导效应器功能诸如抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)是至关重要的(Lifely，M.R.等,Glycobiology 5(1995)813-822;Jefferis,R.等,Immunol.Rev.163(1998)59-76;Wright,A和Morrison,S.L.,Trends Biotech.15(1997)26-32)。P.等.Nature Biotechnol.17(1999)176-180和WO 99/54342显示了β(1,4)-N-乙酰葡糖胺转移酶III(“GnTIII”)（一种催化两分型寡糖形成的糖基转移酶）在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的过表达显著提高抗体的体外ADCC活性。N297碳水化合物的组成变化或其消除也影响Fc结合FcγR和C 1q(Umana P.等,Nature Biotechnol.17(1999)176-180;Davies,J.等,Biotechnol.Bioeng.74(2001)288-294;Mimura,Y.等,J.Biol.Chem.276(2001)45539-45547;Radaev,S.等,J.Biol.Chem.276(2001)16478-16483;Shields,R.L.等,J.Biol.Chem.276(2001)6591-6604;Shields,R.L.等,J.Biol.Chem.277(2002)26733-26740;Simmons,L.C.等,J.Immunol.Methods 263(2002)133-147)。

Iida,S.等,Clin.Cancer Res.12(2006)2879-2887显示了通过添加岩藻糖基化抗CD20抑制无岩藻糖基化抗CD20抗体的效力。无岩藻糖基化的和岩藻糖基化的抗CD20的1:9混合物（10微克/mL）的效力次于单独的无岩藻糖基化抗CD20的1,000倍稀释液（0.01微克/mL）的效力。他们推断出不包含岩藻糖基化对应物的无岩藻糖基化IgG1可以经由其高的FcγRIIIa结合而逃避血浆IgG对ADCC的抑制效果。Natsume,A.等在J.Immunol.Methods 306(2005)93-103中显示了自人IgG1型抗体的复合型寡糖消除岩藻糖导致抗体依赖性细胞的细胞毒性(ADCC)的大大增强。Satoh,M.等,Expert Opin.Biol.The r.6(2006)1161-1173讨论了无岩藻糖基化治疗性抗体作为下一代治疗性抗体。Satoh推断出认为仅由无岩藻糖基化人IgG1形式组成的抗体是理想的。Kanda,Y.等,Biotechnol.Bioeng.94(2006)680-688比较岩藻糖基化CD20抗体（96%岩藻糖基化，CHO/DG441H5）与无岩藻糖基化CD20抗体。Davies,J.等,Biotechnol.Bioeng.74(2001)288-294报告了，对于CD20抗体，升高的ADCC与升高的对FcγRIII的结合相关联。

通过减少岩藻糖量来增强单克隆抗体的细胞介导的效应器功能的方法记载于例如WO 2005/018572、WO 2006/116260、WO 2006/114700、WO2004/065540、WO 2005/011735、WO 2005/027966、WO 1997/028267、US2006/0134709、US 2005/0054048、US 2005/0152894、WO 2003/035835、WO2000/061739、Niwa,R.等,J.Immunol.Methods 306(2005)151-160；Shinkawa,T.等,J.Biol.Chem.278(2003)3466–3473；WO 03/055993或US2005/0249722。CD20和抗CD20抗体