[发明专利]用于提高燃料、化学品和氨基酸产生的副产物蓄积减少的酵母微生物

权利要求书

1.一种包含使用3-酮酸作为中间体的生物合成途径的重组微生物，其中所述重组微生物被工程化以降低或消除催化所述3-酮酸向3-羟基酸副产物转化的一种或多种酶的表达或活性。

2.根据权利要求1所述的重组微生物，其中所述3-酮酸中间体为乙酰乳酸并且所述3-羟基酸副产物为2,3-二羟基-2-甲基丁酸(DH2MB)。

3.根据权利要求2所述的重组微生物，其中来自乙酰乳酸的所述DH2MB碳得率与不包括降低或消除催化乙酰乳酸向DH2MB转化中涉及到的一种或多种酶的表达或活性的亲本微生物相比被降低至少约50%。

4.根据权利要求2所述的重组微生物，其中来自乙酰乳酸的所述DH2MB碳得率与不包括降低或消除催化乙酰乳酸向DH2MB转化中涉及到的一种或多种酶的表达或活性的亲本微生物相比被降低至少约75%。

5.根据权利要求2所述的重组微生物，其中来自乙酰乳酸的所述DH2MB碳得率与不包括降低或消除催化乙酰乳酸向DH2MB转化中涉及到的一种或多种酶的表达或活性的亲本微生物相比被降低至少约95%。

6.根据权利要求2所述的微生物，其中所述重组微生物产生乙酰乳酸衍生的产物。

7.根据权利要求6所述的重组微生物，其中所述乙酰乳酸衍生的产物选自异丁醇、2-丁醇、1-丁醇、2-丁酮、2,3-丁二醇、乙偶姻、二乙酰、缬氨酸、亮氨酸、泛酸、异丁烯、3-甲基-1-丁醇、4-甲基-1-戊醇和辅酶A。

8.根据权利要求1所述的重组微生物，其中所述3-酮酸中间体为2-乙酰-2-羟基丁酸并且所述3-羟基酸副产物为2-乙基-2,3-二羟基丁酸。

9.根据权利要求8所述的重组微生物，其中来自2-乙酰-2-羟基丁酸的所述2-乙基-2,3-二羟基丁酸碳得率与不包括降低或消除催化2-乙酰-2-羟基丁酸向2-乙基-2,3-二羟基丁酸转化中涉及到的一种或多种酶的表达或活性的亲本微生物相比被降低至少约50%。

10.根据权利要求8所述的重组微生物，其中来自2-乙酰-2-羟基丁酸的所述2-乙基-2,3-二羟基丁酸碳得率与不包括降低或消除催化2-乙酰-2-羟基丁酸向2-乙基-2,3-二羟基丁酸转化中涉及到的一种或多种酶的表达或活性的亲本微生物相比被降低至少约75%。

11.根据权利要求8所述的重组微生物，其中来自2-乙酰-2-羟基丁酸的所述2-乙基-2,3-二羟基丁酸碳得率与不包括降低或消除催化2-乙酰-2-羟基丁酸向2-乙基-2,3-二羟基丁酸转化中涉及到的一种或多种酶的表达或活性的亲本微生物相比被降低至少约95%。

12.根据权利要求8所述的重组微生物，其中所述重组微生物产生2-乙酰-2-羟基丁酸衍生的产物。

13.根据权利要求12所述的重组微生物，其中所述2-乙酰-2-羟基丁酸衍生的产物选自2-甲基-1-丁醇、异亮氨酸、3-甲基-1-戊醇、4-甲基-1-己醇和5-甲基-1-庚醇。

14.根据前述权利要求中任一项所述的重组微生物，其中所述催化3-酮酸向3-羟基酸副产物转化的酶为3-酮酸还原酶。

15.根据权利要求14所述的重组微生物，其中所述3-酮酸还原酶为酿酒酵母(S.cerevisiae)YMR226(SEQ ID NO:1)或其同源物或变体。

16.根据权利要求14所述的重组微生物，其中所述3-酮酸还原酶选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ IDNO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ IDNO:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:23或其同源物或变体。