[发明专利]用于将转基因插入安全港座位的内切核酸酶的用途

权利要求书

1.能切割用于将转基因插入个体的基因组的靶序列的变体内切核酸酶，其中

（i）所述基因组含有包含所述靶序列的座位；以及

（ii）所述靶序列位于离反转录病毒插入位点（RIS）至多200kb的距离处，其中所述RIS既不与癌关联也不与异常细胞增殖关联。

2.权利要求1的内切核酸酶，其中所述转基因的插入基本上不修饰位于靶序列附近的基因的表达。

3.权利要求1或2的内切核酸酶，其中所述靶序列位于离最近基因至少100kb的距离处。

4.权利要求1～3之任一项的内切核酸酶，其中所述内切核酸酶是寻靶内切核酸酶。

5.权利要求1～4之任一项的内切核酸酶，其中所述内切核酸酶能切割位于选自下列的座位之内的靶序列：人染色体21q21.1上的SH6座位，人染色体6p25.1上的SH3座位，人染色体7q31.2上的SH4座位，人染色体13q34上的SH12座位，人染色体3p12.2上的SH13座位，人第22染色体上的SH19座位，人染色体12q21.2上的SH20座位，人染色体3p24.1上的SH21座位，人染色体6p12.2上的SH33座位，人染色体2p16.1上的SH7座位，人第5染色体上的SH8座位，SH18座位，SH31座位，SH38座位，SH39座位，SH41座位，SH42座位，SH43座位，SH44座位，SH45座位，SH46座位，SH47座位，SH48座位，SH49座位，SH50座位，SH51座位，SH52座位，SH70座位，SH71座位，SH72座位，SH73座位，SH74座位，SH75座位，SH101座位，SH106座位，SH107座位，SH102座位，SH105座位，SH103座位，SH104座位，SH113座位，SH109座位，SH112座位，SH108座位，SH110座位，SH114座位，SH116座位，SH111座位，SH115座位，SH121座位，SH120座位，SH122座位，SH117座位，SH118座位，SH119座位，SH123座位，SH126座位，SH128座位，SH129座位，SH124座位，SH131座位，SH125座位，SH127座位，SH130座位，SH11座位，SH17座位，SH23座位，SH34座位，SH40座位，SH53座位，SH54座位，SH55座位，SH56座位，SH57座位，SH58座位，SH59座位，SH60座位，SH61座位，SH62座位，SH65座位，SH67座位，SH68座位和SH69座位。

6.变体二聚I-CreI蛋白，其包含各包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:42具有至少80%同一性的序列的2个单体，其中：

（i）所述二聚I-CreI蛋白能切割位于个体的座位之内的靶序列，所述靶序列位于离反转录病毒插入位点（RIS）至多200kb的距离处，及所述RIS既不与癌关联也不与异常细胞增殖关联；以及

（ii）所述靶序列不包含SEQ ID NO:4的序列。