[发明专利]使用免疫球蛋白片段的胰岛素缀合物

权利要求书

1.胰岛素缀合物，其通过将胰岛素与免疫球蛋白Fc区经非肽基聚合物连接而制备，所述非肽基聚合物选自聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇与丙二醇的共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯基醇、多糖、葡聚糖、聚乙烯基乙醚、可生物降解聚合物、脂质聚合物、甲壳素、透明质酸及其组合，其中所述非肽基聚合物与胰岛素β链的氨基端连接。

2.根据权利要求1所述的胰岛素缀合物，其中所述胰岛素是天然胰岛素或者其变体、衍生物或片段，所述其变体、衍生物或片段通过对天然胰岛素中氨基酸的替换、插入、缺失和修饰或其组合中的任意一种方法而制备。

3.根据权利要求1所述的胰岛素缀合物，其中所述非肽基聚合物的两端连接所述免疫球蛋白Fc区的胺基或巯基和胰岛素。

4.根据权利要求1所述的胰岛素缀合物，其中所述免疫球蛋白Fc区是非糖基化的。

5.根据权利要求1所述的胰岛素缀合物，其中所述免疫球蛋白Fc区由选自CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和CH4结构域的一至四个结构域构成。

6.根据权利要求5所述的胰岛素缀合物，其中所述免疫球蛋白Fc区还包括铰链区。

7.根据权利要求1所述的胰岛素缀合物，其中所述免疫球蛋白Fc区是来自于IgG、IgA、IgD、IgE或IgM的Fc区。

8.根据权利要求7所述的胰岛素缀合物，其中所述免疫球蛋白Fc区的每个结构域是不同来源的结构域杂合体，所述不同来源来自于选自IgG、IgA、IgD、IgE和IgM的免疫球蛋白。

9.根据权利要求7所述的胰岛素缀合物，其中所述免疫球蛋白Fc区是由相同来源的单链免疫球蛋白构成的二聚体或多聚体。

10.根据权利要求7所述的胰岛素缀合物，其中所述免疫球蛋白Fc区是IgG4Fc区。

11.根据权利要求10所述的胰岛素缀合物，其中所述免疫球蛋白Fc区是人的非糖基化IgG4Fc区。

12.根据权利要求1所述的胰岛素缀合物，其中所述非肽基聚合物的反应性基团选自醛基、丙醛基、丁醛基、马来酰亚胺基和琥珀酰亚胺衍生物。

13.根据权利要求12所述的胰岛素缀合物，其中所述琥珀酰亚胺衍生物是琥珀酰亚胺丙酸酯、琥珀酰亚胺基羧甲基、羟基琥珀酰亚胺基或琥珀酰亚胺基碳酸酯。

14.根据权利要求12所述的胰岛素缀合物，其中所述非肽基聚合物的两端都具有反应性醛基。

15.一种具有改善的体内持续时间和稳定性的长效胰岛素制剂，其包含权利要求1至14中任一项所述的胰岛素缀合物。

16.根据权利要求15所述的长效胰岛素制剂，其中所述制剂用于治疗糖尿病。

17.一种用于制备权利要求1所述的胰岛素缀合物的方法，其包括以下步骤：

(1)将在其每一端均具有醛、马来酰亚胺或琥珀酰亚胺衍生物反应性基团的非肽基聚合物与免疫球蛋白Fc区的胺基或巯基共价连接；

(2)从(1)所述的反应混合物中分离缀合物，其中所述缀合物包含与所述非肽基聚合物共价连接的所述免疫球蛋白Fc区；以及

(3)将胰岛素与所分离缀合物中所述非肽基聚合物的另一端共价连接，从而生成包含各自连接到所述非肽基聚合物一端的所述免疫球蛋白Fc区和胰岛素的肽缀合物。

18.一种用于制备权利要求1所述的胰岛素缀合物的方法，其包括以下步骤：

(1)在pH 6.0下，将在其每一端均具有醛反应性基团的非肽基聚合物与免疫球蛋白Fc的N-端共价连接；

(2)从(1)所述的反应混合物中分离缀合物，其中所述缀合物包含在其N-端与所述非肽基聚合物共价连接的所述免疫球蛋白Fc区；以及

(3)将胰岛素与所分离缀合物中所述非肽基聚合物的另一端共价连接，从而生成包含各自连接到所述非肽基聚合物一端的所述免疫球蛋白Fc区和胰岛素的肽缀合物。