[发明专利]解淀粉芽孢杆菌菌株

说明书

对相关申请的交叉引用 

本申请要求2010年5月4日提交的美国临时申请号61/331,203根据35U.S.C.119的权益，其内容通过提述全部并入本文。 

对保藏微生物的交叉引用 

本公开涉及保藏的微生物。保藏的微生物的内容通过提述全部并入本文。 

发明领域

本公开涉及解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株NRRLB-50350。该菌株表征为具有优异的淀粉酶、表面活性剂和抗真菌活性的芽孢杆菌属(Bacillus)细菌。此外，本公开的菌株产生多种有用的酶，并具有脂肪酶活性，噬菌体抗性和对pH、盐和温度的高耐受性。本公开的解淀粉芽孢杆菌菌株及其产生的酶在农业生产、洗涤剂工业、生物乙醇工业和烘烤工业领域中具有许多应用。 

发明背景 

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens或B.amyloliquefaciens)是公知的有氧细菌，常常见于土壤样品，其承担世界上大部分α-淀粉酶和蛋白酶的生产。解淀粉芽孢杆菌是一种革兰氏阳性、能动的(motile)、杆状的细菌，其通常形成链状(chains)。其生长的最适温度是30至40℃，在低于15℃或高于50℃不生长。该生物体之前在Priest等,Bacillus amyloliquefaciens sp.nov.,nom.rev.,International Journal of Systematic Bacteriology,37,69-71(1987)(通过提述以其整体并入本文)中描述并与枯草芽孢杆菌(B.subtilis)相区分。该生物体亦表征为具有较低G+C的生物体。 

已显示解淀粉芽孢杆菌的菌株BNM122可为有希望的化学农业处理的生态替代方案，并用于开发可持续的农业管理以替代或减少农用化学品的使用和/或滥用。举例而言，一项研究报道使用解淀粉芽孢杆菌作为以环境友好的 替代方案为特征的微生物生物控制剂(MBCA)，以减少或替代植物疾病的化学控制。参见，例如Correa等,Bacillus amyloliquefaciens BNM122,a potentialmicrobial biocontrol agent applied on soybean seeds,causes a minor impact onrhizosphere and soil microbial communities,Applied Soil Ecology 41,185-194(2009)(通过提述以其整体并入本文)。在此解淀粉芽孢杆菌的菌株当作为种子上的覆层以控制土壤传播的真菌病原体等时，显示为定殖于种子和根。 

解淀粉芽孢杆菌的菌株MIR-41亦已描述为α-淀粉酶超生产者(hyperproducer)。该菌株已与其他微生物组合用于从淀粉底物产生乙醇。参见，例如Abate等,Production of amylolytic enzymes by Bacillus amyloliquefaciens inpure culture and in co-culture with Zymomonas mobilis,Biotechnology Letters 21,249-252(1999)(通过提述并入本文)。 

感兴趣的现有技术包括美国专利号6,960,342，其涉及的解淀粉芽孢杆菌呈现广谱抗真菌活性。该公开亦涉及使用解淀粉芽孢杆菌菌株或包含该新颖菌株的抗真菌组合物以供控制广泛范围的真菌植物病原体。 

美国专利号6,589,524涉及含有芽孢杆菌属特定菌株的生物控制组合物和方法，所述菌株选自下组：蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)NRRL B-30517和NRRL B-30519，解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)NRRL B-30518以及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)NRRL B-30520。在此，所述特定菌株在组合中提供了针对病原性真菌的作用。所述病原性真菌包括多种疫霉属(Phytoph thora)菌种如辣椒疫霉(P.capsici)。 

WO/2005/059112涉及解淀粉芽孢杆菌KTGB0202，和使用其控制植物病原体的方法。该菌株具有针对作物白粉病(powdery mildew)的控制作用和针对植物病原性真菌的广谱抗真菌活性，并抑制烟草花叶病毒感染，以及含有该细菌、用于控制白粉病的生态友好的细菌培养液。