[发明专利]条件表达治疗蛋白的载体，包含所述载体的宿主细胞，及其应用

权利要求书

1.一种条件表达有一种或多种具有治疗蛋白功能的蛋白的载体，所述载体包含编码基因开关的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含(1)操作性连接启动子的至少一个转录因子序列，其中所述至少一个转录因子序列编码配体依赖性转录因子，和(2)编码一种或多种有治疗蛋白功能的蛋白的多核苷酸，所述多核苷酸操作性连接到通过所述配体依赖性转录因子激活的启动子。

2.如权利要求1所述的载体，其特征在于，所述治疗蛋白选自下组：促血红细胞生长素、生长素释放肽、骨保护素、RANKL、RANKL诱饵（decoy）、TNF-α拮抗剂、IL-1拮抗剂、G-CSF、GM-CSF、IFN-α、IFN-γ、血管他汀、内皮他汀、TNF-α、PP1DCY-LSRLOC、β-葡糖苷酸酶、IL-12、a-半乳糖苷酶A、芳香基硫酸酯酶A、a-葡糖苷酶、b-葡糖苷酶、葡糖脑苷脂酶、CLN6蛋白、青少年相关CLN3、N-磺氨基葡糖磺基水解酶（sulfoglucosamine sulfohyrolase）(SGSH)、a-N-乙酰氨葡萄糖苷酶、乙酰-辅酶A-氨基葡糖苷乙酰基转移酶、N-乙酰基葡糖胺-6-硫酸酯酶、a-L-艾杜糖苷酸酶（iduronidase）、芳香基硫酸酯酶B、酸性鞘磷脂酶、艾杜糖醛酸硫酸酯酶（iuduronate sulfatase）和血浆铜蓝蛋白。

3.如权利要求1所述的载体，其特征在于，所述治疗蛋白是一种或多种选自下组的免疫调节剂：IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10R DN或其亚基、IL-15、IL-18、IL-21、IL-23、IL-24、IL-27、GM-CSF、IFNα、IFNβ、IFNα1、IFNα2、IL-15-R-α、CCL3(MIP-1a)、CCL5(RANTES)、CCL7(MCP3)、XCL1(淋巴细胞趋化因子)、CXCL1(MGSAα)、CCR7、CCL19(MIP-3b)、CXCL9(MIG)、CXCL10(IP-10)、CXCL12(SDF-1)、CCL21(6Ckine)、OX40L、4-1BBL、CD40、CD70、GITRL、LIGHT、b-防御素、HMGB1、Flt3L、IFNβ、TNFα、dnFADD、BCG、TGFα、PD-L1RNAi、PD-L1反义寡核苷酸、TGFbRII DN、ICOS-L、S100、CD40L、p53、存活素、p53-存活素融合、MAGE3、PSA和PSMA。

4.如权利要求1-3中任一项所述的载体，其特征在于，所述载体选自下组：质粒、腺病毒、逆转录病毒、腺相关病毒、痘病毒、杆状病毒、痘苗病毒、单纯疱疹病毒、爱泼斯坦-巴尔病毒、腺病毒、双生病毒（geminivirus）、花椰菜花叶病毒、脂质体、带电脂质(细胞转染剂)、DNA-蛋白复合物和生物聚合物。

5.如权利要求1-4中任一项所述的载体，其特征在于，所述载体是腺病毒载体。

6.如权利要求1-5中任一项所述的载体，其特征在于，所述载体还包含编码有IL-12功能的蛋白的多核苷酸。

7.如权利要求6所述的载体，其特征在于，所述编码所述一种或多种有免疫调节剂功能蛋白的多核苷酸和编码所述有IL-12功能蛋白的所述多核苷酸受所述基因开关调节的启动子控制。

8.如权利要求1-7中任一项所述的载体，其特征在于，所述基因开关是基于蜕皮激素受体(EcR)的基因开关。

9.如权利要求1-8中任一项所述的载体，其特征在于，所述编码基因开关的多核苷酸包含在第一启动子控制下的第一转录因子序列和在第二启动子控制下的第二转录因子序列，其中由所述第一转录因子序列和所述第二转录因子序列编码的蛋白相互作用形成作为配体依赖性转录因子的蛋白复合物。

10.如权利要求1-9中任一项所述的载体，其特征在于，所述编码基因开关的多核苷酸包含在启动子控制下的第一转录因子序列和第二转录因子序列，其中由所述第一转录因子序列和所述第二转录因子序列编码的蛋白相互作用形成作为配体依赖性转录因子的蛋白复合物。

11.如权利要求10所述的载体，其特征在于，所述第一转录因子序列和所述第二转录因子序列通过EMCV内部核糖体进入位点(IRES)连接。