[发明专利]嵌合MOMP抗原、方法和使用

说明书

技术领域

本发明总体上涉及能够诱导抗沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis）的保护性免疫应答(反应)的多肽类的领域。更具体地说，本发明涉及这些多肽类的生产并涉及包括它们的药用组合物。

背景技术

已知形成沙眼衣原体的外膜复合物的蛋白质之一的主要外膜蛋白（MOMP）能够诱导两种T-细胞应答并且中和哺乳动物（如人类）的抗衣原体感染的抗体。MOMP蛋白质的示意性概观在图1中示出，改编自Findlay HE,McClafferty H&Ashley RH(2005)，重组沙眼衣原体主要外膜蛋白的表面表达、单通道分析和膜拓扑学（Surface expression,single-channel analysis and membranetopology of recombinant Chlamydia trachomatis major outer membrane protein）。BMCMicrobiology 5,5是一篇阐明MOMP蛋白质的拓扑学的论文。在图1中，A表示细胞膜而B表示细胞膜的外表面。

将总MOMP蛋白质用作抗沙眼衣原体的疫苗已在WO 2008/040757A1中披露。

不过，动物实验已表明抗-衣原体的MOMP亚单位疫苗的成功非常有限。此外，整体MOMP蛋白质的生产是繁琐的和昂贵的，更不用说还受限于某些特定的生产方法。

为了克服上述的缺陷，已有人提出使用合成肽类，所述合成肽类结合了来自沙眼衣原体的特异性表位，这些表位触发免疫应答。

不过，所述分离的表位在合成的背景下可能不具备功能性，并因而不能提供希望的效果。

因此，用于产生抗沙眼衣原体的保护性免疫应答的改进的多肽会是有优势的，并且尤其是允许有增大的灵活性、成本效率、简化的生产和纯化同时具有保留或改进的免疫效应的多肽会是有优势的。

发明内容

因此,本发明优选寻求减轻、缓和或消除本领域的一个或多个上述缺陷以及单独或以任何组合形式的缺点的解决方案并且通过提供根据所附权利要求所述的多肽解决至少上面提到的问题。

本发明的一般解决方案是提供一种多肽，所述多肽易于生产和纯化，但具有保留的用于产生抗沙眼衣原体的免疫应答的能力。

因此，根据第一方面，提供了一种多肽。所述多肽包括第一氨基酸序列，所述第一氨基酸序列具有与根据SEQ ID NO：1的氨基酸序列至少90%（如至少95%）的同源性（%一致性），如用标准设置通过BLAST算法进行测量；和第二氨基酸序列，所述第二氨基酸序列具有与根据SEQ ID NO：2的氨基酸序列至少90%（如至少95%）的同源性，如用标准设置通过BLAST算法进行测量；其中所述第一和第二氨基酸序列被少于30个氨基酸残基分开。所述第一和第二氨基酸序列分别包括用于产生抗沙眼衣原体的保护性的抗原-特异性免疫应答的表位，以及沙眼衣原体的主要外膜蛋白（MOMP）的跨膜部分的一部分。所述第一和第二氨基酸序列合起来包括大约25个表位，这些表位可能刺激T细胞应答（CD4+和CD8+）以及B细胞应答。这样的优点是与整个(完整的)MOMP蛋白质相比，该多肽易于以纯化的形式生产，同时仍诱导可接受的免疫应答。多肽（每个包括MOMP的跨膜部分的一部分）的优点是表位的三维结构被保存(是保守的)，因为两个跨膜部分可能互相作用以形成疏水结构，如图14中所示。包括MOMP的跨膜部分的一部分的多肽的另一个优点是在生产过程中，表位被保留在构造中。这样的另一个优点是为嵌合体的两个部分之间的疏水相互作用提供了可能，继而提供可模拟整个MOMP蛋白质的抗原特征的三维域。因此，通过去除根据第一方面的多肽中的大部分的MOMP蛋白质的膜部分，获得了比野生型MOMP更易于处理的多肽；并且通过同时保留特别选定的、在序列端部的膜螺旋(体)的最小部分，获得了与较短的人工序列相比更稳定并且可能更有效的多肽。

一并考虑，所述多肽提供了基于MOMP蛋白质的替代的合成肽，所述合成肽是抗原性的并且适用作疫苗。

具体地说，与只有两个链接(结合)表位的人工的较短的序列相比，所述多肽能够实现保留或改进的抗原性，同时与野生型MOMP相比易于生产和纯化。

在一个实施例中，所述多肽的长度在107和132个氨基酸之间，如在107和112个氨基酸之间的长度。这样的优点是所述多肽更易于表达。

在一个实施例中，所述第一氨基酸序列和第二氨基酸序列被根据SEQ IDNO：20或SEQ ID NO：26的接头分开。