[发明专利]重编程细胞

权利要求书

1.将非多能哺乳动物细胞诱导为诱导的多能干细胞的方法，所述方法包括在足以将细胞诱导成为多能干细胞的条件下将非多能细胞与3’-磷酸肌醇依赖性激酶-1(PDK1)激活剂接触，由此将所述非多能哺乳动物细胞诱导为诱导的多能干细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述PDK1激活剂是变构的PDK1激活剂。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述PDK1激活剂是(Z)-5-(4-氯苯基)-3-苯基戊-2-烯酸(″PS48″)，(Z)-5-(4-溴-2-氟苯基)-3-苯基戊-2-烯酸(″PS08″)，2-(3-(4-氯苯基)-3-氧代-1-苯基丙基硫代)乙酸，(Z)-5-(萘-2-基)-3-苯基戊-2-烯酸(″12Z″)，或(Z)-5-(1H-吲哚-3-基)-3-苯基戊-2-烯酸(″13Z″)。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述PDK1激活剂是PS48。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，所述方法还包括将所述非多能细胞与TGFβ受体/ALK5抑制剂接触。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述TGFβ受体/ALK5抑制剂是A-83-01。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，所述方法还包括将所述非多能细胞与MEK抑制剂接触。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述MEK抑制剂是PD0325901。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，所述方法还包括将所述非多能细胞与组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂接触。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述HDAC抑制剂是丁酸钠(NaB)。

11.根据权利要求9所述的方法，其中所述HDAC抑制剂是丙戊酸(VPA)。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述条件包括将至少一种外源转录因子引入到所述非多能细胞中。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述外源转录因子包括多肽。

14.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述外源转录因子包括Oct多肽。

15.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述外源转录因子包括选自由Oct多肽和Klf多肽组成的组的多肽。

16.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述外源转录因子包括选自由Oct多肽、Klf多肽、Myc多肽和Sox多肽组成的组的多肽。

17.根据权利要求12或13所述的方法，所述方法包括将至少两种、三种或四种外源转录因子引入到所述非多能细胞中，其中所述外源转录因子各自包括选自由Oct多肽、Klf多肽、Myc多肽和Sox多肽组成的组的不同多肽。

18.根据权利要求12-17中任一项所述的方法，其中所述外源转录因子通过将多核苷酸引入到所述非多能细胞中来引入，其中所述多核苷酸编码所述外源转录因子，由此在所述非多能细胞中表达一种或多种转录因子。

19.根据权利要求12-17中任一项所述的方法，其中所述外源转录因子通过将所述外源转录因子与所述非多能细胞接触来引入。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述外源转录因子包含增强跨细胞膜运输的氨基酸序列。

21.根据权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述非多能细胞是人细胞。

22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中所述PDK1激活剂以这样的浓度存在：所述浓度足以在足以诱导所述非多能细胞向所述诱导的多能干细胞转化的条件下将所述非多能细胞诱导为诱导的多能干细胞的效率提高至少10％。

23.根据权利要求1所述的方法，其中接触包括将所述非多能细胞与PDK1激活剂在不存在MEK抑制剂的情况下接触，之后将所述非多能细胞与PDK1激活剂和MEK抑制剂接触。