[发明专利]具有葡糖淀粉酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸有效
申请号: | 201180029136.X | 申请日: | 2011-04-11 |
公开(公告)号: | CN102933596A | 公开(公告)日: | 2013-02-13 |
发明(设计)人: | 李明;段俊欣;刘峥;福山志朗;绫部圭;G.科沃德-凯利;R.戴因哈默 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司 |
主分类号: | C07K14/385 | 分类号: | C07K14/385;C12N9/34;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/00;C12P19/20;C12P7/00;C12R1/80 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 封新琴 |
地址: | 丹麦*** | 国省代码: | 丹麦;DK |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 葡糖 淀粉酶 活性 多肽 编码 多核苷酸 | ||
1.一种具有葡糖淀粉酶活性的分离的多肽,其选自下组:
(a)多肽,其包含氨基酸序列,所述氨基酸序列与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有优选至少61.5%,更优选至少63%,更优选至少65%,更优选至少68%,更优选至少70%,更优选至少75%,更优选至少80%,更优选至少85%,更优选至少90%,更优选至少91%,更优选至少92%,甚至更优选至少93%,最优选至少94%,和甚至最优选至少95%,如甚至至少96%,97%,98%,99%或100%同一性;
(b)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在优选至少低严格条件,更优选至少中等严格条件,甚至更优选至少中-高严格条件,最优选至少高严格条件,和甚至最优选至少非常高严格条件下与以下杂交:
(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,
(ii)包含SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列,或
(iii)(i)或(ii)的全长互补链;
(c)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少61.5%,更优选至少63%,更优选至少65%,更优选至少68%,更优选至少70%,更优选至少75%,更优选至少80%,更优选至少85%,更优选至少90%,更优选至少91%,更优选至少92%,甚至更优选至少93%,最优选至少94%,和甚至最优选至少95%,如甚至至少96%,97%,98%,99%或100%同一性;
(d)SEQ ID NO:2的成熟多肽包含一个或多个(例如,几个)氨基酸的取代、缺失和/或插入的变体;和
(e)(a),(b),(c)或(d)的多肽具有葡糖淀粉酶活性的片段。
2.权利要求1的多肽,其包含或组成为SEQ ID NO:2的氨基酸序列,或其具有葡糖淀粉酶活性的片段。
3.权利要求1的多肽,其包含或组成为SEQ ID NO:2的成熟多肽。
4.权利要求1的多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸包含或组成为SEQID NO:1的核苷酸序列,或其编码具有葡糖淀粉酶活性的片段的亚序列。
5.权利要求1的多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸包含或组成为SEQID NO:1的成熟多肽编码序列。
6.权利要求1的多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸包含于大肠杆菌DSM 23123中包含的质粒AMG1。
7.权利要求1-6任一项的多肽,其中所述成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸22至616。
8.权利要求1-7任一项的多肽,其中所述成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:1的核苷酸64至1848。
9.一种分离的多核苷酸,其包含核苷酸序列,所述核苷酸序列编码权利要求1-8任一项的多肽。
10.权利要求9的分离的多肽,通过以下获得:
(a)将DNA群体在优选至少低严格条件,更优选中等严格条件,甚至更优选中-高严格条件,最优选至少高严格条件,和甚至最优选至少非常高严格条件下与以下杂交:
(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,
(ii)包含SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列,或
(iii)(i)或(ii)的全长互补链;和
(b)分离所述杂交多核苷酸,其编码具有葡糖淀粉酶活性的多肽。
11.权利要求9的分离的多核苷酸,其包含或组成为SEQ ID NO:1或SEQ IDNO:1的成熟多肽编码序列。
12.一种核酸构建体或表达载体,其包含权利要求9-11任一项的多核苷酸,所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个(例如,几个)调控序列,其指导所述多肽在表达宿主中的产生。
13.一种重组表达载体,其包含权利要求12的核酸构建体。
14.一种重组宿主细胞,其包含权利要求12的核酸构建体。
15.一种产生权利要求1-8任一项的多肽的方法,其包括:(a)在有助于多肽产生的条件下培养细胞,所述细胞以其野生型形式产生所述多肽;和(b)回收所述多肽。
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