[发明专利]增生性疾病的治疗

说明书

技术领域

本发明涉及预防或治疗增生性疾病（增殖性疾病，proliferative disease）的方法。具体地，本发明涉及源自或可源自植物的组合物的应用（用途），如植物防御素，尤其涉及其在预防或治疗增生性疾病如癌症的方法中的应用。本发明还涉及相关的应用、系统和试剂盒。

相关申请的引用

本申请要求2010年6月24日提交的美国临时专利申请号61/358,126的优先权，其全部内容在此引用作为参考。

有关联邦政府资助研究的声明

不适用

背景技术

众所周知，无论是组成型还是诱导型，植物可产生多种化合物，以保护自身免受环境应力、损伤或微生物侵袭的伤害。

迄今已表征的大多数植物抗菌蛋白（抗微生物蛋白）具有相同的特征。它们一般为小的（<10kDa）、高碱性蛋白且通常包含偶数个半胱氨酸残基（通常为4、6或8）。这些半胱氨酸全部参与分子内的二硫键，并使蛋白质赋有结构和热力学稳定性（Broekaert et al.(1997)）。根据氨基酸序列的同源性，主要参考半胱氨酸残基的数目和间距，对一些不同家族进行定义。它们包括植物防御素（Broekaert等，1995，1997；Lay等，2003a）、硫素（thionins）（Bohlmann，1994）、脂质转移蛋白（Kader，1996，1997）、橡胶蛋白（hevein）（Broekaert等，1992）和knottin类蛋白（Cammue等，1992），以及源自光壳澳大利亚坚果（Macadamia integrifolia）（Marcus等，1997；McManus等，1999）和凤仙花（Impatiens balsamina）（Tailor等，1997；Patel等，1998）的抗菌蛋白（表1）。虽然不同的蛋白家族可能利用不同机制发挥作用，但所有的这些抗菌蛋白均在靶微生物质膜水平发挥活性（Broekaert等，1997）。环蛋白为一种小的、常见于茜草科（Rubiaceae）和堇菜科（Violaceae）家族（参考Craik等，1999，2004；Craik，2001）成员中的富含半胱氨酸的植物肽的新型家族。这些不寻常的环状肽（表1）具有多种生物活性，包括抗菌性（Tarn等，1999）、抗HIV性（Gustafson等，1994）和杀虫（Jennings等，2001）特性。

表1植物中小的、富含半胱氨酸的抗菌蛋白

植物抗菌蛋白中代表性成员的成熟蛋白大小和半胱氨酸残基间距如表1所示。共有序列中的数字表示代表性成员中的高度保守的半胱氨酸残基间的氨基酸数，但该家族中其他成员的半胱氨酸间的长度稍许不同。连接线表示二硫键。虚线表示环蛋白的环状主链（源自Lay和Anderson，2005）。

防御素

之前术语“防御素”在本领域内被用于描述由许多不同物种产生且在特有的防御病原体，包括细菌、真菌、酵母菌和病毒中发挥功能的一个多样的分子家族。

植物防御素

植物防御素（也称为γ-硫素）为具有八个半胱氨酸残基的小的（~5kDa，45至54个氨基酸）碱性蛋白。在构型上，该八个半胱氨酸残基可形成四个严格保守的二硫键:Cys_I-Cys_VIII，Cys_II-Cys_IV，Cys_III-Cys_VI和Cys_V-Cys_VII。除了这四个严格保守的二硫键外，一些植物防御素还具有另外的二硫键（Lay等，2003a，2003b；Janssen等，2003）。

名称“植物防御素”起源于1995年，由Terras和他的同事创造，其在萝卜种子中分离出两种抗真菌蛋白（Rs-AFP1和Rs-AFP2）并注意到这些蛋白质的一级和三维结构水平明显与植物α/β-硫素不同，但却与昆虫和哺乳动物防御素具有一些结构相似性（Terras等，1995；Broekaert等，1995）。

虽然相对有限，但植物防御素还是表现出明显的序列保守性。严格保守的是八个半胱氨酸残基和位置34（相对于Rs-AFP2编号）上的甘氨酸。在大多数序列中，位置8上的丝氨酸、位置11上的芳香族残基、位置13上的甘氨酸和位置29上的谷氨酸也是保守的（Lay等，2003a；Lay和Anderson，2005）。