[发明专利]一种重组肿瘤疫苗及其生产方法

说明书

背景技术

抗原提呈是适应性免疫应答中的一个过程，期间抗原提呈细胞捕获抗原并将抗原提呈至其表面以供T细胞识别。抗原和主要组织相容性复合物(MHC)分子位于抗原提呈细胞表面，其能够被T细胞受体识别和结合，藉此促进抗原提呈。一旦T细胞识别了细胞表面的抗原，其活化并产生针对抗原的免疫应答。通过抗原提呈，T细胞能够产生针对外源性抗原和内源性抗原的免疫应答。

细胞因子在免疫应答调控中发挥着重要作用。细胞因子是由免疫系统中的细胞分泌的低分子量蛋白，其具有发送调节免疫系统信号的功能。不同细胞因子能够传送不同信号。例如，某些细胞因子能够刺激免疫细胞的增殖或成熟；某些细胞因子能够引导免疫细胞的迁移；以及某些细胞因子能够增强基于细胞的免疫应答。

据信，癌症或肿瘤至少部分地与人体内对癌变的免疫应答减弱或缺乏相关。多种疗法已被用于治疗癌症，包括基因疗法。用于癌症治疗的基因疗法可以涉及到输送能够杀伤或抑制癌细胞的基因、能够增强针对癌细胞免疫应答的基因、能够修复或代替基因突变或改变的基因、或能够使癌细胞对化疗或放疗更为敏感的基因。

发明概述

本发明涉及用于预防或治疗肿瘤和癌症的重组肿瘤疫苗。该肿瘤疫苗可以包含编码用于预防和治疗肿瘤以及癌症的抗原提呈肽、细胞因子和其它因子的核酸，和/或含有此类核酸的表达载体，和/或含有此类核酸和/或表达载体的宿主细胞。本发明还涉及包含肿瘤疫苗的药物组合物以及使用肿瘤疫苗预防和治疗肿瘤和癌症的方法。

一方面，本发明提供了一种重组肿瘤疫苗，其包含编码抗原提呈多肽的第一多核苷酸、编码细胞因子的第二多核苷酸、和至少一个启动子的组合物，其中至少一个启动子操作性地连接至第一多核苷酸和第二多核苷酸中的至少一个。

另一方面，本发明提供了一种重组肿瘤疫苗，其包含具有编码抗原提呈多肽的第一多核苷酸片段、编码细胞因子的第二多核苷酸片段、和至少一个启动子的表达载体，其中至少一个启动子操作性地连接至第一多核苷酸片段和第二多核苷酸片段中的至少一个。

另一方面，本发明提供了一种药物组合物，包含药学上可接受的载体以及含有编码抗原提呈多肽的第一多核苷酸、编码细胞因子的第二多核苷酸、和至少一个启动子的肿瘤疫苗，其中至少一个启动子操作性地连接至第一多核苷酸和第二多核苷酸中的至少一个。

另一方面，本发明提供了一种治疗肿瘤的方法，包括向对象给予药物组合物，其包含药学上可接受的载体以及含有编码抗原提呈多肽的第一多核苷酸、编码细胞因子的第二多核苷酸、和至少一个启动子的肿瘤疫苗，其中至少一个启动子操作性地连接至第一多核苷酸和第二多核苷酸中的至少一个。

另一方面，本发明提供了一种药物组合物，包含药学上可接受的载体以及含有编码抗原提呈多肽的第一多核苷酸片段、编码细胞因子的第二多核苷酸片段、和至少一个启动子的肿瘤疫苗，其中至少一个启动子操作性地连接至第一多核苷酸片段和第二多核苷酸片段中的至少一个。

另一方面，本发明提供了一种治疗肿瘤的方法，包括向对象给予药物组合物，其包含药学上可接受的载体以及含有编码抗原提呈多肽的第一多核苷酸片段、编码细胞因子的第二多核苷酸片段、和至少一个启动子的肿瘤疫苗，其中至少一个启动子操作性地连接至第一多核苷酸片段和第二多核苷酸片段中的至少一个。

前述发明概述仅仅是示例性的，而非旨在以任何方式进行限定。另外除上文所述示例性的方面、实施方式和特征外，更多方面、实施方式和特征将通过引用附图和下文的详细说明给出。

附图的简要说明

图1为表达载体pAd-HSP-hGM-CSF的示意图。

图2为腺病毒基因组Ad-HSP-hGM-CSF的示意图。

图3为腺病毒基因组Ad-HSP-mGM-CSF的示意图。

图4显示了在B16细胞(a)、Hep3B细胞(b)、和Hela细胞(c)中通过ELISA测定的mGM-CSF的表达水平，其分别在10、100和1000的感染复数(MOI)下被Ad-HSP-mGM-CSF感染。

图5显示了在B16细胞(a)、Hep3B细胞(b)、和Hela细胞(c)中通过ELISA测定的hHSP70的表达水平，其分别在10、100和1000的MOI下被Ad-HSP-mGM-CSF感染。