[发明专利]适合用于美容和药物用途的外用透皮糖胺聚糖制剂

说明书

技术领域

本发明涉及外用（topical）糖胺聚糖制剂，所述制剂促进糖胺聚糖（其通过脂质部分与1-10%的二糖单体单元的共价连接而修饰）穿透皮肤屏障进入皮肤的表皮层和真皮层中，由此无需注射地实现糖胺聚糖的真皮施用。具体地，通过它们的将透明质酸（hyaluronan）递送至表皮层和真皮层的能力（所述透明质酸在皮肤中保留比外部地递送的透明质酸更长时间段），本制剂因此适合用于真皮年轻化、增强、透明质酸补充和保护疗法。所述组合物也可以用作治疗化合物（包括多肽、蛋白和其它类似大小的生物大分子）的递送装置，从而促进它们穿过皮肤屏障。也提供了一种产生所述组合物的方法，其中通过使用活化剂作为限制试剂来控制脂质部分与糖胺聚糖的共价连接程度。

背景技术

面部老化过程发生在一系列可预测的事件中，表现为皮肤体积和弹性（elastic tone）的损失。皮肤体积损失（其源自许多因素，包括胶原分解）导致皮肤的皮下脂肪层、基础肌肉层和筋膜层的萎缩，促进鼻唇沟、下巴线清晰度损失和皮肤粗化。皮肤弹性损失导致松弛的、下垂的面部组织。为了抵抗这些效应，年轻化手术尝试修正体积损失和组织品质，以导致处理过的皮肤的天然外观。这些手术可能涉及组织填充剂的使用（例如，胶原注射）、或由“提升”外科手术提供的紧绷以及其它选择，它们单独使用或联合使用。

许多暂时性的组织填充剂（诸如胶原、透明质酸和羟磷灰石）目前是可得到的，但是，这些填充剂通过一系列注射来施用，且仅提供暂时效应，在胶原和透明质酸的情况下，通常不能延续超过12个月。更长期的解决方案诸如羟磷灰石（其可以持续2-5年）也包括脂肪自身移植术（持续1-3年），其使用皮下脂肪细胞来修正面部体积损失和下垂，以恢复面部皮肤的更年轻的外观^1,2,3。注射处理的后效应（其可以持续多达1周）可以包括：肿胀、发红、疼痛、伤痕和压痛。另外，所述处理需要通过多次注射来熟练地应用，并带来在注射部位处感染的风险。

在提供皮肤的年轻外观中，角质形成细胞可能是最重要的细胞类型。因而，它们是维持皮肤水合所必需的，且对环境因素（诸如紫外线辐射）的老化效应特别敏感，因为它们比其它皮肤细胞类型更经常地暴露于这些因素。此外，新近的证据提示，遗传上确定的角质形成细胞因子也可以促进固有的老化过程。因为角质形成细胞产生影响成纤维细胞和其它真皮细胞的健康/功能的旁分泌因子，因此，对角质形成细胞功能有害的因子对真皮细胞功能也是有害的⁶。

透明质酸（也称作透明质酸盐和透明质酸）是一种大的、带负电荷的糖胺聚糖多糖，其普遍存在于体内，且以特别大的量存在于皮肤中⁴。真皮和表皮皮肤层都富含透明质酸，所述透明质酸作为包围的细胞外基质（其也含有胶原和其它蛋白）的一部分存在，在所述细胞外基质处，它包围细胞（例如，表皮的角质形成细胞和真皮的成纤维细胞）⁵。尽管年轻皮肤在角质形成细胞层和真皮层中都富含细胞外周透明质酸，在老化皮肤的这2个层中的量减少，其中角质形成细胞层中的透明质酸损失比在真皮层中的损失远远更显著⁶。

在年轻皮肤中，透明质酸有效地包围表皮中的角质形成细胞和真皮中的成纤维细胞，呈胶冻样被膜（细胞外被），其为细胞提供适当的生长因子和营养因子，所述因子促进年轻外观皮肤特有的胶原和弹性蛋白产生。除了透明质酸以外，细胞被膜或外被的主要组分也发现是细胞外蛋白和其它物质，诸如胶原、蛋白聚糖（PG）诸如TSG-6和其它糖胺聚糖。透明质酸的三维结构是可以缠绕自身的浅螺旋（高分子量形式可检测为长直链），从而提供在细胞周围装配基质的理想模板。这些被膜或外被通常通过透明质酸与细胞受体（例如，CD44、RHAMM、LYVE 1和其它受体）的结合而保持在细胞周围。随着皮肤老化，真皮成纤维细胞和角质形成细胞的维持它们的透明质酸被膜的能力减少，从而导致老化皮肤的脱水的和下垂的外观^5,7。另外，当皮肤受到创伤（例如，通过暴露于过量的紫外线辐射（晒伤））时，真皮中细胞的透明质酸产生减少，从而导致透明质酸降解的增加和透明质酸降解产物在皮肤中的增加的存在。