[发明专利]Fab糖基化抗体

权利要求书

1.用于控制抗体或其功能片段或衍生物的循环半衰期的方法，其包括步骤

(a)在包含抗体或其功能片段或衍生物的组合物中增加连接于存在于所述抗体或其片段或衍生物的Fab部分中的至少一个糖基化位点的碳水化合物中的唾液酸的量用于增加循环半衰期；

其中糖基化位点由氨基酸序列Asn Xaa Ser或Asn Xaa Thr组成，其中Xaa为除了Pro以外的任何氨基酸，所述抗体为IgG抗体；

其中所述抗体为嵌合或人源化抗-EGFR抗体，其包含

(i)包含由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的CDRH1、由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成的CDRH2、由SEQ ID NO:3的氨基酸序列组成的CDRH3的重链可变区；

(ii)包含由SEQ ID NO:4的氨基酸序列组成的CDRL1、由SEQ ID NO:5的氨基酸序列组成的CDRL2、由SEQ ID NO:6的氨基酸序列组成的CDRL3的轻链可变区；

(iii)存在于Fab部分中在根据Kabat编号重链可变区85号位氨基酸处的糖基化位点；以及

(iv)存在于Fc部分在重链恒定区2的297号位氨基酸处的糖基化位点；

或者，所述抗体为嵌合或人源化抗-TA-Muc1抗体，其包含

(i)包含由SEQ ID NO:7的氨基酸序列组成的CDRH1、由SEQ ID NO:8的氨基酸序列组成的CDRH2、由SEQ ID NO:9的氨基酸序列组成的CDRH3的重链可变区；

(ii)包含由SEQ ID NO:10的氨基酸序列组成的CDRL1、由SEQ ID NO:11的氨基酸序列组成的CDRL2、由SEQ ID NO:12的氨基酸序列组成的CDRL3的轻链可变区；

(iii)存在于Fab部分中在根据Kabat编号重链可变区54号位氨基酸处的糖基化位点；以及

(iv)存在于Fc部分在重链恒定区2的297号位氨基酸处的糖基化位点。

2.根据权利要求1的方法，其中连接于存在于所述抗体或其片段或衍生物的Fab部分中的至少一个糖基化位点的碳水化合物为复合型碳水化合物。

3.根据权利要求1或2的方法，其中步骤(a)包含一项或多项以下特征：

(i)增加唾液酸的量以使组合物中连接于存在于Fab部分中的至少一个糖基化位点的碳水化合物中至少50％包含至少一个唾液酸残基；

(ii)增加唾液酸的量以使组合物中连接于存在于Fab部分中的至少一个糖基化位点的碳水化合物中每条碳水化合物链的唾液酸残基的平均量为至少0.8；

(iii)增加连接于存在于Fab部分中的至少一个糖基化位点的碳水化合物中唾液酸的量而组合物中连接于存在于所述抗体或其片段或衍生物的Fc部分中的至少一个糖基化位点的碳水化合物中低于20％包含至少一个唾液酸；以及

(iv)增加唾液酸的量的步骤，包括在细胞或细胞系具有高的唾液酸化活性的条件下，于所述细胞或细胞系中表达所述抗体或其片段或衍生物。

4.根据权利要求3的方法，其中特征(iii)增加连接于存在于Fab部分中的至少一个糖基化位点的碳水化合物中唾液酸的量而组合物中连接于存在于所述抗体或其片段或衍生物的Fc部分中的至少一个糖基化位点的碳水化合物中低于10％包含至少一个唾液酸。

5.根据权利要求1或2的方法，其中存在于所述抗体或其片段或衍生物的Fab部分中的至少一个糖基化位点存在于重链可变区或轻链可变区中。

6.根据权利要求5的方法，其中存在于所述抗体或其片段或衍生物的Fab部分中的至少一个糖基化位点存在于重链可变区中。

7.根据权利要求5的方法，其中存在于所述抗体或其片段或衍生物的Fab部分中的至少一个糖基化位点存在于可变区的骨架区中。

8.根据权利要求1或2的方法，其中包含所述抗体或其片段或衍生物的组合物中，所述抗体或其片段或衍生物中至少50％在Fab部分糖基化。