[发明专利]体细胞至诱导的重编程神经干细胞(irNSC)的转化

权利要求书

1.一种产生神经干细胞(NCS)的方法，包括：

a)提供体细胞，

b)通过导入选自Bmi1、Sox2、Mash1、Sox11、Emx2、Foxg1和Pax6的至少两个基因，将所述体细胞重编程为NSC；和

c)用生长因子和小分子诱导重编程。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括

d)在适于NSC增殖的条件下孵育步骤b)和c)的产物。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤a)的体细胞是人细胞。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中步骤a)的体细胞选自成纤维细胞、角质形成细胞和脂肪细胞。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中步骤c)的生长因子和小分子是化学上定义的培养基的补充物。

6.根据权利要求5所述的方法，其中化学上定义的培养基是补充有胰岛素、转铁蛋白和孕酮的无血清培养基。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中步骤b)的至少两个基因包含Bmi1和Sox2。

8.根据权利要求7所述的方法，其中步骤b)的至少两个基因额外地包含选自Mash1、Sox11、Emx2、Foxg1和Pax6的至少一个基因。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其中步骤b)的至少两个基因包含Bmi、Sox2和Mash1。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中步骤c)的生长因子选自FGF2、EGF和BDNF。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中步骤c)的小分子包含ROCK抑制剂。

12.根据权利要求11所述的方法，其中ROCK抑制剂选自1-(5-异喹啉磺酰基)高哌嗪、N-苄基-2-(嘧啶-4-基氨基)噻唑-4-甲酰胺、(+)-(R)-反-4-(1-氨乙基)-N-(4-吡啶基）环己烷甲酰胺二盐酸盐和N-{(3R，4R)-4-[4-(2-氟-6-羟基-3-甲氧基-苯甲酰基)-苯甲酰氨基]-吖庚烷-3-基}-4-羟基-3，5-二甲基-苯甲酰胺。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中体细胞用组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂预处理。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述体细胞的重编程是通过慢病毒递送至少两个基因的组合实现的。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法获得的神经干细胞。

16.根据权利要求15所述的神经干细胞作为CNS疾病体外模型的用途。

17.治疗用组合物，其包含根据权利要求15所述的神经干细胞。

18.根据权利要求17所述的治疗用组合物，其中神经干细胞分化成神经元或胶质细胞。

19.通过根据权利要求1至14中任一项所述的方法获得的NSC生物样本库。

20.基本上如本文所述的方法和用途。