[发明专利]糖苷水解酶61家族蛋白在纤维素加工中的用途

权利要求书

1.一种制造组合物的方法，包括组合以下：

a)来自嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)的分离或重组的GH61蛋白；和

b)选自内切葡聚糖酶(EG)、β-葡糖苷酶(BGL)、1型纤维二糖水解酶(CBH1)和2型纤维二糖水解酶(CBH2)的一种或多种纤维素酶。

2.一种制造组合物的方法，包括组合以下：

a)来自嗜热毁丝霉的分离或重组的GH61蛋白；和

b)选自内切葡聚糖酶(EG)、β-葡糖苷酶(BGL)、1型纤维二糖水解酶(CBH1)和2型纤维二糖水解酶(CBH2)的一种或多种纤维素酶；

其中在纤维素经历被包含EG、BGL、CBH1和CBH2的酶组合糖化的反应中，与所述GH61蛋白不存在时的相同糖化反应相比，所述GH61蛋白增加葡萄糖的产量至少20％。

3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述GH61蛋白是重组的。

4.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述GH61蛋白通过从嗜热毁丝霉培养物分离GH61蛋白活性而获得。

5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其中所述GH61蛋白增加所述反应中的葡萄糖的产量至少约50％。

6.如权利要求5任一项所述的方法，其中所述GH61蛋白增加葡萄糖的产量至少约2倍。

7.一种制造组合物的方法，包括组合以下：

a)包含与SEQ ID NO：1至30的任一种至少约80％、约85％、约90％、约95％、约97％或约99％相同的氨基酸序列的重组产生的GH61蛋白；和

b)选自内切葡聚糖酶(EG)、β-葡糖苷酶(BGL)、1型纤维二糖水解酶(CBH1)和2型纤维二糖水解酶(CBH2)的一种或多种纤维素酶。

8.一种组合物，包含：

a)包含与选自由SEQ ID NO：1至30和SEQ ID NO：1至30的任一种的具有GH61活性的片段组成的组的序列至少约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约97％或约99％相同的氨基酸序列的重组产生的GH61蛋白；和

b)选自内切葡聚糖酶(EG)、β-葡糖苷酶(BGL)、1型纤维二糖水解酶(CBH1)和2型纤维二糖水解酶(CBH2)的一种或多种纤维素酶，

其中在纤维素经历被包含EG、BGL、CBH1和CBH2的酶组合糖化的反应中，与所述GH61蛋白不存在时的相同反应相比，所述GH61蛋白增加葡萄糖的产量至少20％。

9.如权利要求8所述的组合物，其中所述GH61蛋白包含与SEQ ID NO：2、或其具有GH61活性的片段至少95％相同的氨基酸序列。

10.如权利要求8所述的组合物，其中所述GH61蛋白包括与GH61o、GH61v、GH61x、GH61b和GH61e(SEQ ID NO：6、13、15、16、19、30)的任一种；或其具有GH61活性的片段至少95％相同的氨基酸序列。

11.如权利要求8所述的组合物，其中所述GH61蛋白包括与GH61f、GH61v、GH61p、GH61g和GH61i(SEQ ID NO：7、13、20、21、23、26)的任一种；或其具有GH61活性的片段至少95％相同的氨基酸序列。

12.如权利要求8所述的组合物，其中所述GH61蛋白包括SEQ ID NO：1至30的任一种；或其具有GH61活性的片段。

13.如权利要求8至12任一项所述的组合物，包含两种、三种、或多于三种纤维素酶。

14.如权利要求8至13任一项所述的组合物，其中所述纤维素酶是重组的。

15.如权利要求8至14任一项所述的组合物，其中所述纤维素酶是真菌酶类。

16.如权利要求8至15任一项所述的组合物，其中所述纤维素酶来自嗜热毁丝霉。

17.如权利要求8至16任一项所述的组合物，包括在一种宿主细胞群体中表达编码所述GH61蛋白的基因，和在另一种宿主细胞群体中表达编码纤维素酶的至少一种基因。