[发明专利]染料组合物和染料合成

说明书

发明领域

本发明涉及磺化不对称五甲炔光学染料领域，尤其是适于体外生物学应用和体内成像的染料。提供了能够抑制不期望的新鉴定的杂质的改进的染料组合物和中间体。

发明背景

通过引入磺酸基(-SO₃H或-SO₃^-)取代基来磺化染料为提高染料的水溶性的已建立的方法。

WO 2005/044923和US 2007/0203343 A1公开了可用于标记和检测生物学分子的新一类磺化五甲炔和七甲炔花青染料的合成。包括合成不对称花青染料Cy7及其N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯：

Cy7-NHS酯

WO 2005/123768公开了磺化的花青染料与RGD肽的缀合物，以及所述缀合物在诊断光学成像技术中的用途。

Jiang等人[Tet. Lett.，48，5825-5829(2007)]公开了一种使用聚(乙二醇)作为可溶性载体合成不对称水溶性花青染料的有效方法。

WO 2008/139206公开了具体的一类不对称五甲炔花青染料的合成以及它们作为成像剂用于体内光学成像的用途。WO 2008/139206的实施例3提供了染料Cy5**的合成：

其中M¹为H或生物相容的阳离子。

然而，现有技术染料合成，尤其是合成不对称花青染料，确实经受低收率，具有复杂的劳动密集型纯化方法(例如，制备HPLC)，由于样品载荷考虑，其最适于毫克规模。当用于生物学应用，尤其是体内光学成像时，需要这样的染料能以多克量得到，为药物级别，其中抑制不希望的杂质。

本发明

本发明提供可用于合成不对称磺化光学染料的组合物，其中鉴定和抑制了以前未认识到的杂质。鉴定和控制这样的杂质对于良好制造实践(GMP)是重要的。还提供了可用于合成不对称光学染料的染料中间体组合物以及染料制备方法，所述方法通过抑制关键的杂质提供改进的染料组合物。

本发明允许以克量制备磺化不对称五甲炔花青染料，为药物级别，其中抑制不希望的杂质。当制备这样的磺化染料用于生物学应用，尤其是当制备染料与生物学分子的缀合物用于体内光学成像时，所述组合物和方法特别有用。

发明详述

在第一方面，本发明提供一种染料组合物，所述染料组合物包含式A的不对称花青染料以及式B和式C的对称花青染料：

其特征在于，所述染料组合物包含至少92%的A以及小于2%的B和小于2%的C，

其中在所述组合物内：

R¹和R²独立地为H、-SO₃M¹或R^a，其中M¹为H或B^c，

并且B^c为生物相容的阳离子；

R³为H或R^d基团；

R⁴和R⁵独立地为R^d基团；

R⁶-R⁹独立地为C_1-3烷基或R^c基团，并且选择使得在式A中，R⁶-R⁹中至少一个为R^c；

R^a为C_1-4磺基烷基；

R^b为C_1-6羧基烷基；

R^c为R^a或R^b基团；

R^d为C_1-5烷基或R^c基团；

条件是，在式A中：

(i) 取代基对R¹/R²、R⁴/R⁵、R⁶/R⁸和R⁷/R⁹中至少一对不同；