[发明专利]利用生产麻风树油甲酯(JME)的副产品生产用于脂质提取的含油小球藻的综合方法

权利要求书

1.利用由麻风树整粒种子生产麻风树油甲酯(JME)的副产品生产用于脂质提取的含油小球藻的综合方法，所述方法包括以下步骤：

i.通过已知方法提供含有4-6％(w/w)氮的作为生产麻风树油甲酯(JME)副产品的麻风树种子的脱油渣饼；

ii.用热的酸性水溶液水解步骤(i)提供的所述脱油渣饼，然后用碱性物质调节pH至5.5-8.5的范围内，以得到富氮麻风树油渣饼水解产物(JOCH)；

iii.通过已知方法提供含有粗甘油的甲醇贫化的甘油层(GL7和GL8)；

iv.将1-5％(w/v)的步骤(iii)提供的所述含有粗甘油的甲醇贫化的甘油层(GL7和GL8)添加到1-10％(v/v)的步骤(ii)得到的麻风树油渣饼水解产物，以制备用于小球藻的生长与生产培养基；

v.将1-10％(v/v)的所述小球藻种子培养物接种到步骤(iv)得到的生长与生产培养基中，并在温度为25-40℃，pH为7.0-8.0下，培养7至15天的时间，以得到含脂质的生物质；

vi.或者可替换地，将1-10％(v/v)的所述小球藻种子培养物在种子培养物接种的第1天用自来水接种，在初始的4-10天中只用海水或在自来水中1∶2稀释的海水培养，随后在第4-10天之后添加GL7，以得到含脂质的生物质；

vii.或者可替换地，将1-10％(v/v)的所述小球藻种子培养物在种子培养物接种的第1天用自来水接种，在初始的4-10天中只用海水或在自来水中1∶2稀释的海水培养，随后在第4-10天之后添加GL8，以得到含脂质的生物质；

viii.任选地，将1-10％(v/v)的所述小球藻种子培养物接种到步骤(iii)得到的生长与生产培养基中，并在户外生物质生产期间添加紫外线专用染料，以保护所述培养物在40℃-50℃的温度下不受紫外线损伤，保持所述培养物的活力，并在温度为25-40℃，pH为7.0-8.0下，培养7至15天的时间，以得到含脂质的生物质；

ix.在太阳下干燥步骤(iv-vii)得到的所述生物质，或直接将湿的生物质用于脂质提取；

x.通过已知方法从步骤(viii)得到的生物质中提取脂质。

2.如权利要求1所述的综合方法，其中所使用的酸选自H₃PO₄和H₂SO₄。

3.如权利要求1所述的综合方法，其中所述碱性物质选自粗甘油层、氢氧化钾和氢氧化镁。

4.如权利要求1所述的综合方法，其中所使用的紫外线染料为2，5-双(5-叔丁基-1，3-苯并噁唑-2-基)噻酚。

5.如权利要求1所述的综合方法，其中，甲醇贫化的甘油层通过已知方法从所述甘油层中去除所述乙醇而得到。

6.如权利要求1所述的综合方法，其中相对于细胞干重，所述脂质的产率在20至35％的范围内。