[发明专利]制造包含VL结构域的结合蛋白的小鼠

权利要求书

1.小鼠，其在其种系中包括可操作地连接于重链恒定区核酸序列的未重排的轻链V区段和未重排的J区段。

2.权利要求1的小鼠，其中所述未重排的轻链V区段选自：人κ区段，人λ区段，以及它们的组合。

3.权利要求1的小鼠，其中所述重链恒定区核酸序列选自：C_H1序列，铰链序列，C_H2序列，C_H3序列，以及它们的组合。

4.权利要求1的小鼠，其中所述未重排的轻链V区段和所述未重排的J区段在内源小鼠重链基因座处替代内源小鼠重链V区段和内源小鼠重链J区段。

5.权利要求4的小鼠，其中所述未重排的轻链V区段替代内源小鼠重链基因座的全部或基本上全部功能性小鼠重链V区段。

6.权利要求4的小鼠，其中所述未重排的J区段包括轻链J区段，且所述轻链J区段替代内源小鼠重链基因座的全部或基本上全部功能性小鼠重链J区段。

7.权利要求6的小鼠，其中所述未重排的轻链V区段和未重排的轻链J区段可操作地连接，且所述小鼠在所述未重排的轻链V区段和未重排的轻链J区段之间缺少功能性D区段。

8.权利要求7的小鼠，其中所述未重排的轻链V区段为人κ区段且所述未重排的轻链J区段为人κ区段。

9.权利要求1的小鼠，其包含B细胞，所述B细胞在其基因组中包括含有可操作地连接于小鼠恒定区基因的人κ可变区的经重排的免疫球蛋白基因。

10.权利要求1的小鼠，其中所述经重排的免疫球蛋白基因位于内源小鼠免疫球蛋白重链基因座处。

11.权利要求1的小鼠，其还在其种系中包括可操作地连接于轻链恒定基因的人轻链V区段和人轻链J区段。

12.权利要求11的小鼠，其中所述轻链恒定基因为小鼠轻链恒定基因。

13.权利要求12的小鼠，其中所述人轻链V区段为人κV区段。

14.权利要求13的小鼠，其中所述小鼠轻链恒定基因为小鼠κ轻链恒定基因。

15.从其种系表达免疫球蛋白的小鼠，所述免疫球蛋白包含：含有与免疫球蛋白重链恒定区相融合的第一人轻链可变区序列的第一多肽，以及，含有与免疫球蛋白轻链恒定区相融合的第二人轻链可变区的第二多肽。

16.权利要求15的小鼠，其中所述第一人轻链可变区序列包含人κ可变区序列，且所述第二人轻链可变区选自人κ可变区和人λ可变区。

17.权利要求16的小鼠，其中所述免疫球蛋白重链恒定区选自人重链恒定区和小鼠重链恒定区。

18.权利要求16的小鼠，其中所述免疫球蛋白轻链恒定区选自人轻链恒定区和小鼠轻链恒定区。

19.权利要求16的小鼠，其中所述第一多肽从缺少功能性内源重链V基因区段的经修饰的内源小鼠免疫球蛋白重链基因座表达。

20.权利要求19的小鼠，其中所述第二多肽从缺少功能性内源轻链V基因区段的经修饰的内源小鼠免疫球蛋白轻链基因座表达。

21.小鼠，其在所述小鼠的种系的内源小鼠免疫球蛋白重链基因座处包括用至少六个或更多个未重排的轻链V基因区段和一个或多个未重排的J基因区段替代全部或基本上全部功能性内源小鼠重链可变基因区段，其中所述未重排的轻链V基因区段与所述J基因区段可操作地连接，其中所述小鼠不能表达源自重链V基因区段的免疫球蛋白重链，并且其中所述小鼠包含脾脏B细胞群(B220⁺/IgM⁺)，其为野生型小鼠脾脏B细胞群(B220⁺/IgM⁺)的大小的至少约75%。

22.根据前述任一项权利要求的小鼠用于产生包含人轻链可变结构域的结合蛋白的用途。

23.根据权利要求1-21中任一项的小鼠用于产生抗体的用途。

24.权利要求23的用途，其中所述抗体为人抗体。

25.根据权利要求1-21中任一项的小鼠用于产生双特异性抗体的用途。