[发明专利]新型氨基转移酶、编码该酶的基因和它们的利用法有效
申请号: | 201180046993.0 | 申请日: | 2011-09-28 |
公开(公告)号: | CN103140580A | 公开(公告)日: | 2013-06-05 |
发明(设计)人: | 长泽透;吉田丰和;石田浩一;伊藤纪幸;川野茂;八十原良彦 | 申请(专利权)人: | 株式会社钟化 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/10;C12P13/00;C12P41/00 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张永新 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 氨基转移酶 编码 基因 它们 利用 | ||
1.以下(a)~(d)中任一项中记载的多肽:
(a)包括序列表的序列编号1所示的氨基酸序列的多肽;
(b)包括在序列表的序列编号1所示的氨基酸序列中缺失、取代、插入和/或添加了1个或多个氨基酸的氨基酸序列、且具有在氨基供体的存在下与1-苄基-3-吡咯烷酮作用生成光学纯度93%e.e.以上的(S)-1-苄基-3-氨基吡咯烷的活性的多肽;
(c)包括与序列表的序列编号1所示的氨基酸序列具有60%以上的序列同一性的氨基酸序列、且具有在氨基供体的存在下与1-苄基-3-吡咯烷酮作用生成光学纯度93%e.e.以上的(S)-1-苄基-3-氨基吡咯烷的活性的多肽;
(d)包括与序列表的序列编号1所示的氨基酸序列具有60%以上的序列同一性的氨基酸序列、且具有在氨基供体的存在下与1-苄基-3-吡咯烷酮作用生成光学纯度93%e.e.以上的(S)-1-苄基-3-氨基吡咯烷的活性,且具有下述(1)和/或(2)的性质的多肽:
(1)底物特异性:
(a)氨基供体:对于(S)-1-苯乙胺、苯甲胺和±2-丁基胺显示活性,对于β-丙氨酸和4-氨基丁酸实质上不显示活性,
(b)氨基受体:对于丙酮酸和乙醛酸分别显示活性,
(2)水溶性有机溶剂耐性:在终浓度为80%v/v的1-丙醇、2-丙醇、丙酮中的任意有机溶剂中处理2小时后的残留活性保持为处理前的总活性的10%以上。
2.包括编码权利要求1所述的多肽的碱基序列的DNA。
3.根据权利要求2所述的DNA,其为下述(A)~(C)中任一项所述的DNA:
(A)包括序列表的序列编号2所记载的碱基序列的DNA;
(B)在严谨条件下,和包括与序列表的序列编号2所记载的碱基序列互补的碱基序列的DNA杂交的DNA;
(C)包括在序列表的序列编号2所记载的碱基序列中取代、缺失、插入和/或添加了1个或多个碱基的碱基序列的DNA。
4.一种载体,其包含权利要求2或3所述的DNA。
5.一种转化体,其通过权利要求4所述的载体转化宿主细胞而得到。
6.一种光学活性氨基化合物的制造方法,其包括:
在氨基供体的存在下,使权利要求1所述的多肽或权利要求5所述的转化体的培养物与酮化合物作用。
7.一种通式(2)所示的光学活性氨基化合物的制造方法,其包括:
在氨基供体的存在下,使权利要求1所述的多肽或权利要求5所述的转化体的培养物与通式(1)所示的酮化合物作用,
上式(1)中,R1和R2表示任选被取代的烷基、任选被取代的芳烷基或任选被取代的芳基,R1和R2两者任选相互结合形成环,其中,R1和R2结构不同,
上式(2)中,R1和R2与上述式(1)相同,*表示不对称碳原子。
8.一种光学活性氨基化合物的制造方法,其包括:
在氨基受体的存在下,使权利要求1所述的多肽或权利要求5所述的转化体的培养物与氨基化合物的对映体混合物作用。
9.一种光学活性氨基化合物的制造方法,其中,
在氨基受体的存在下,使权利要求1所述的多肽或权利要求5所述的转化体的培养物与通式(3)所示的氨基化合物的对映体混合物作用,得到通式(4)所示的光学活性氨基化合物,
上式(3)中,R1和R2表示任选被取代的烷基、任选被取代的芳烷基或任选被取代的芳基,R1和R2两者任选相互结合形成环,其中,R1和R2结构不同,
上式(4)中,R1和R2与上述式(3)相同,*表示不对称碳原子。
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