[发明专利]针对人前列腺素E2 受体EP4 的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及对人前列腺素E₂受体亚型EP4的单克隆抗体。

背景技术

前列腺素（PG）是与血栓素一起被称为前列腺素类的生理活性物质，是具有前列腺烷酸骨架的脂质。前列腺素等前列腺素类是利用磷脂酶A2由从膜磷脂质游离的花生四烯酸生物合成的。前列腺素根据附于其五元环的氧原子和双键的不同被区分为A～J各组。另外，根据前列腺烷酸骨架侧链的双键数，被区分为1～3组。例如，前列腺素E（PGE）中，存在有前列腺烷酸骨架侧链中存在的双键数不同的PGE₁、PGE₂、PGE₃各组。

对于PG，由利用环氧合酶I（COX-I）或环氧合酶II（COX-II）从花生四烯酸生物合成的PGG₂而产生PGH₂，其后，根据氧原子间键的断裂的不同，产生PGD₂、PGE₂、PGF_2α等。进而，由PGE₂产生PGA₂、PGC₂等。认为各PG的生成反应根据特异性酶的作用而产生，这些酶中存在组织特异性，产生与各组织的功能相适应的PG。

PG中PGE具有各种重要的生物活性，认为介由其特异性的受体与血管扩张、血压下降、子宫收缩以及免疫系统的调节等相关。PGE₂的受体与其它的PG受体同样地是7次膜贯通G蛋白质偶联受体。PGE₂受体简称为EP，已知存在4种亚型（EP1、EP2、EP3、EP4）。各亚型在生物体内，EP1与细胞内Ca^2＋的上升相关，EP2和EP4与cAMP的上升相关，EP3与cAMP的减少相关（非专利文献1）。4种亚型在蛋白质构造上具有很高的相同性。

报道了将对EP4选择性高的低分子化合物拮抗剂向诱导了实验性自身免疫性脑脊髓炎或接触过敏症的小鼠给药时，所属淋巴节内的TH1和TH17细胞两者的蓄积减少，抑制了疾病的发展（非专利文献2）。示出了树状细胞中，PGE₂由于EP4的活化所致的cAMP上升而使IL-23的产生亢进。另外，示出了在TH17细胞中，PGE₂与IL-23协调地导致TH17细胞的增殖。示出了在TH17细胞中，EP4的活化所致的cAMP上升对细胞内信息传递发挥重要的作用（非专利文献3）。从这样的报告可知，PGE₂受体、特别是EP4选择性拮抗剂对治疗因TH1或TH17涉及的免疫异常而导致的疾病有效果，该疾病例如有多发性硬化症、类风湿性关节炎、炎症性肠病以及接触性皮肤炎等（非专利文献2）。

报道了大多癌细胞与正常细胞相比，COX-II过量表达。进而显示PGE₂对癌组织或周边组织起作用，与癌的发展有关。例如，示出了PGE₂与难治性的炎症性乳腺癌细胞或肺癌细胞对转移组织的浸润相关（非专利文献4、5）。另外可知，PGE₂介由EP4与非小细胞肺癌细胞、大肠癌细胞、炎症性乳腺癌细胞、B淋巴细胞、前列腺癌细胞、黑色素瘤的增殖相关。

已知NK细胞具有直接攻击癌细胞的作用，但PGE₂抑制该作用。作为PGE₂抑制NK细胞活性的机制，显示有EP4的活化所致的细胞内的cAMP上升（非专利文献6）。另外，已知被认为抑制癌免疫的Treg细胞介由EP4而活化，有可能使生物体内对癌细胞的免疫机制降低（非专利文献7）。从这样的报告可知，PGE₂对癌的发展很重要。因此，尝试了与PGE₂的产生相关的COX的非选择性抑制剂的临床研究，但由于副作用无法得到充分的治疗成绩。PGE₂受体、特别是EP4选择性拮抗剂能够直接抑制癌细胞的增殖，并且能够激活自身的癌免疫机制，所以期待与EP4受体选择性地结合的抗体对各种癌的治疗有效果，所述的癌例如有乳腺癌、大肠癌、肺癌、前列腺癌、皮肤癌、B淋巴瘤。