[发明专利]降解或水解多糖的方法

权利要求书

1.一种降解或水解多糖的方法，其包括使所述多糖与一种或多种氧化水解酶接触，其中在存在至少一种还原剂和至少一种二价金属离子的情况下实施所述降解或水解。

2.如权利要求1的方法，其中所述多糖是壳多糖或纤维素。

3.如权利要求1或2的方法，其中所述氧化水解酶是CBM33家族蛋白(优选CBP21)或GH61家族蛋白。

4.如权利要求1-3中任一项的方法，其中在所述方法中使用两种或更多种氧化水解酶。

5.如权利要求4的方法，其中所述氧化水解酶中一种是CBM33家族蛋白且所述氧化水解酶中另一种是GH61家族蛋白。

6.如权利要求1-5中任一项的方法，其中所述氧化水解酶是一种多肽，所述多肽包含如SEQ ID NO:1-16的任一个中所列出的氨基酸序列、或与所述氨基酸序列具有至少30%序列同一性的序列、或其生物学活性片段，所述片段包含所述序列的至少100个氨基酸。

7.如权利要求1-6中任一项的方法，其中所述多糖是纤维素。

8.如权利要求7的方法，其中所述氧化水解酶是GH61蛋白、E7、CelS2、Cfla_0175、Cfla_0172、Cfla_0316、Cfla_0490、CJA_2191、CJA_3139或SCO1734。

9.如权利要求7或8的方法，其中所述氧化水解酶是一种多肽，所述多肽包含如SEQ ID NO:1-3或6-16的任一个中所列出的氨基酸序列、或与所述氨基酸序列具有至少30%序列同一性的序列、或其生物学活性片段，所述片段包含所述序列的至少100个氨基酸。

10.如权利要求1-9中任一项的方法，其中所述还原剂是抗坏血酸、还原型谷胱甘肽、Fe(II)SO₄、LiAlH₄、NaBH₄或木质素或其片段。

11.如权利要求1-10中任一项的方法，其中所述二价金属离子是Ca²⁺、Co²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺、Ni²⁺或Zn²⁺。

12.如权利要求1-10中任一项的方法，其中所述二价金属离子是Cu²⁺。

13.如权利要求1-12中任一项的方法，其进一步包括：

(a)使所述多糖(或其降解或水解产物)与选自纤维素水解酶或壳多糖水解酶的一种或多种糖分解酶接触，并

(b)任选地，使所述多糖(或其降解或水解产物)与一种或多种β-葡糖苷酶接触，

其中优选地，使所述酶和所述氧化水解酶同时与所述多糖接触。

14.如权利要求13的方法，其中所述糖分解酶是壳多糖酶或纤维素酶。

15.一种生成可溶性糖的方法，其中所述方法包括通过如权利要求1-14中任一项所限定的方法来降解或水解多糖，其中所述降解或水解释放所述可溶性糖，以及任选地将所述可溶性糖分离。

16.如权利要求15的方法，其中所述可溶性糖是壳二糖和/或N-乙酰葡糖胺和/或其寡糖，或者纤维二糖和/或葡萄糖和/或其寡糖。

17.一种生成有机物质的方法，其包括下列步骤：

(i)通过如权利要求1-16中任一项的方法来降解或水解多糖以生成包含可溶性糖的溶液；

(ii)将所述可溶性糖发酵以生成所述有机物质作为发酵产物；以及任选地

(iii)回收所述有机物质。

18.如权利要求17的方法，其中所述有机物质是醇。

19.如权利要求18的方法，其中所述醇是乙醇。