[发明专利]用于评价HIV疫苗功效的动物模型

权利要求书

1.一种用于产生HIV疫苗组合物的方法，其包括步骤：

a)产生包含HIV-1特异性抗体的文库，

b)通过用HIV-1肽、尤其天然和/或重组HIV-1肽淘洗，富集所述文库中的HIV-1-特异性抗体，

c)扩增包含HIV-1肽、多肽或蛋白质的HIV-1材料，

d)使用与支持物结合的步骤b)的HIV-1-特异性抗体收集所扩增HIV-1材料的HIV-1肽，

e)通过质谱法、尤其通过MS-MS鉴定和表征在步骤d)中获得的HIV-1肽，

f)克隆编码在步骤e)中所鉴定的肽的gp120gp160基因片段，

g)使用步骤f)的结果，在真核表达系统中表达糖基化的env HIV-1肽，

h)纯化糖基化的env HIV-1肽，和

i)产生疫苗组合物，

其特征在于为了克隆和/或表达步骤f)和/或g)中的糖基化env HIV-1肽，使用选自以下的至少一种引物：

(i)用于A、G、B、C、F1、H亚型的V1正向：

5'-CTC TGY GTY ACT TTA XXX XXX XXX-3'(SEQ ID No.1)，

(ii)用于全部亚型的V2正向：

5'-AAA ACT GCT CTT WCA XXX XXX XXX-3'(SEQ ID No.3)，

(iii)用于A、B、G亚型的V3正向：

5'-TAV AAA TTA ATT GTA XXX XXX XXX X-3'(SEQ ID No.5)，

(iv)用于D亚型的V3正向：

5'-TAV CAA TTA ATT GCA XXX XXX XXX X-3'(SEQ ID No.7)，

(v)用于全部亚型的V4正向：

5'-GAA TTT TTC TAT TGY AAXXX XXX XXX-3'(SEQ ID No.9)，

(vi)用于A、B、D、G亚型的V5正向：

5'-ACA AGA GAT GGT GGX XXX XXX X-3'(SEQ ID No.11)，和

(vii)用于C亚型的V5正向：

5'-ACA CGT GAT GGA GGX XXX XXX X-3'(SEQ ID No.13)，

和至少一种选自以下的引物：

(viii)用于A、B、D亚型的gp41(160)反向：

ATA GCG GCC GCC TAG TGG TGG TGA TGG TGG TGT AG YAA AGC YCT TTC NAA GCC CTG TC(SEQ ID No.46)，

(ix)(viii)的引物衍生物，其缺少编码His-标签的序列和/或包含编码标签的序列，

(x)用于亚型A稀有变体的gp41(160)反向：

ATA GCG GCC GCC TAG TGG TGG TGA TGG TGG TGT AGC AAA GCY CTT TCN GCG CCC TGT C(SEQ ID No.66)，

(xi)用于C亚型的gp41(160)反向：

ATA GCG GCC GCC TAG TGG TGG TGA TGG TGG TGT WGC AAA GCT GCT TCA AAG CCC TGT C(SEQ ID No.67)，

(xii)用于G亚型的gp41(160)反向：

ATA GCG GCC GCC TAG TGG TGG TGA TGG TGG TGT AGC AAA GCY CTT TCN AAG CCT TGT C(SEQ ID No.68)，

(xiii)用于全部亚型的gp120反向Const5：

5'-ATA GCG GCC GCC TAG TGG TGG TGA TGG TGG TGT CTT TTT TCT CTY TSC ACC ACT CTY CT-3'(SEQ ID No.52)，

和

(xiiii)(viii)的引物衍生物，其缺少编码His-标签的序列和/或包含编码标签的序列。

2.根据权利要求1所述的方法，其中使用引物(i)、(ii)、(iii)、(iv)、(v)、(vi)和/或(vii)的2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、18种或更多种变体，其中所述变体差异在于变量“X”。