[发明专利]小分子阵列及其制造和使用方法

说明书

技术领域

本发明一般涉及药物研发和生物化学。在替代性实施方案中，本发明提供了例如阵列或微阵列等制品，其包含细胞和化合物（例如小分子或药物），用于例如药物筛选或毒性测试。

背景技术

常规的高通量小分子筛选是使用液体处理机器人（liquid handling robot）以多孔格式进行的。典型地，将细胞在多孔板（例如96到3456个孔）中培养，并将小分子添加到每个孔中。对于每种化合物，每个孔（例如就3456孔板而言）中的单位培养面积为约3mm²。大规模的筛选需要昂贵的液体处理机器人。每个测试都需要1μl化合物。

常规的微阵列药物筛选将药物固定在载玻片上的聚(dl-丙交酯-乙交酯)（PLGA）中，然后接种细胞，覆盖整个载玻片。有效的药物将会干扰细胞存活和增殖，从而产生细胞较少的点。然而，覆盖整个载玻片需要较大数量的细胞。因为在每个点之间没有屏障，所以细胞可以从一个点自由迁移到另一个点。受不同点影响的细胞可能相互作用，并导致实验的独立性较差。缺乏屏障还会引起阅读区域的界限不够分明，导致定量更困难且精确性更差。

发明内容

在替代性实施方案中，本发明提供了包含阵列或微阵列或由阵列或微阵列组成的制品，以及其制造和使用方法。在替代性实施方案中，本发明提供了用于制造阵列或微阵列的方法，且本发明的制品包含通过本发明的方法制造的阵列或微阵列。

在替代性实施方案中，本发明提供了制品，其包含：

固体、半固体、凝胶或凝胶状、胶体或溶胶-凝胶基质，所述基质基本上包含防止或抑制细胞粘附或不能维持细胞粘附的表面或涂层（或涂料），且所述表面或涂层（或涂料）包含能够粘附一个或多个细胞的多个点或受限或限定区域，

其中任选地，防止或抑制细胞粘附的表面或涂层（或涂料）包括聚丙烯酰胺或水凝胶、或涂布有聚丙烯酰胺或涂布有水凝胶的表面、或其组合，

且任选地，包含表面或涂层（或涂料）的固体、半固体、凝胶或凝胶状、胶体或溶胶-凝胶基质的表面包括或者是涂布有聚丙烯酰胺或涂布有水凝胶的玻璃或载玻片，

且任选地，在点样或印刷之前对涂布有水凝胶的玻璃或载玻片进行脱水，

且任选地，固体或半固体基质包含玻璃或等同物或由玻璃或等同物组成，且任选地，将聚丙烯酰胺或水凝胶交联到经过硅烷活化的玻璃或载玻片上；

且任选地，能够粘附一个或多个细胞的多个点或受限区域包含一种或多种组合物或组合物的混合物，所述组合物能够促进、启动和/或维持细胞粘附于多个点或受限区域（且任选地，在包含能够促进、启动和/或维持细胞粘附的一种或多种组合物的点或受限区域中，所述一种或多种组合物或组合物的混合物直接粘附于固体、半固体、凝胶或凝胶状、胶体或溶胶-凝胶基质上，而不粘附于防止或抑制细胞粘附的表面或涂层或涂料上），

且任选地，能够促进、启动和/或维持细胞粘附的一种或多种组合物包含一种或多种细胞外基质蛋白，或分子的细胞外基质状组合物或混合物，例如纤维状蛋白和糖胺聚糖（GAG）的联锁网状物，或蛋白聚糖（PG）、硫酸乙酰肝素（HS）、硫酸软骨素（CS）、硫酸角质素（KS）、透明质酸、胶原蛋白、弹性蛋白、纤维粘连蛋白、层粘蛋白、细胞粘附分子（CAM）或CAM配体、整合素、钙粘附蛋白、选凝素、地址素（addressin）或其混合物或其等同物，

且任选地，细胞是哺乳动物细胞或人细胞。

在替代性实施方案中，制品包含阵列或微阵列，或由阵列或微阵列组成，或被制造成阵列或微阵列的形式。

在替代性实施方案中，本发明提供了通过包含以下步骤的方法制造的制品：

(a)提供化合物、药物、小分子或小分子药物，和能够聚合的单体溶液；

(b)提供固体、半固体、凝胶或凝胶状、胶体或溶胶-凝胶基质；

(c)(i)混合化合物、药物、小分子或小分子药物与单体溶液，且任选地还包含能够启动和/或催化单体聚合的第二溶液或组合物（或在所述第二溶液或组合物中混合），并将混合物点样或印刷到固体、半固体、凝胶或凝胶状、胶体或溶胶-凝胶基质的表面的多个受限区域（例如点）上，或

(ii)将化合物、药物、小分子或小分子药物点样或印刷到固体、半固体、凝胶或凝胶状、胶体或溶胶-凝胶基质的表面的多个受限区域（例如点）上，随后将能够聚合的单体溶液点样或印刷到基本上每个被点样或印刷的化合物、药物、小分子或小分子药物点或印记上面（之上），其中任选地：

(1)单体溶液起初包含能够启动和/或催化单体聚合的第二溶液或组合物，且单体溶液在点样或印刷步骤后发生聚合，