[发明专利]裂殖酵母属酵母的转化体及其制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及裂殖酵母属酵母的转化体及其制造方法，具体涉及可生产β-葡糖苷酶的裂殖酵母属酵母的转化体及其制造方法。

背景技术

为了由木材或稻草、稻壳、杂草等纤维素类生物质生产作为发酵原料的糖并进而生产生物乙醇等生物质燃料，必须降解作为植物细胞壁的主要构成成分的纤维素。纤维素的降解有浓硫酸糖化法或稀硫酸糖化法等酸糖化法、利用酶的酶糖化法等方法，在近年来生物技术迅猛发展的背景下，进行了大量酶糖化法的研究开发。纤维素的酶糖化利用被总称为纤维素酶的一类酶。首先，具有随机切断纤维素链的活性的内切葡聚糖酶(EG)将纤维素的非晶体区域降解，使葡萄糖末端露出。露出的葡萄糖末端被纤维二糖水解酶(CBH)降解，纤维二糖游离。接着，β-葡糖苷酶(BGL)将游离的纤维二糖降解，从而葡萄糖游离。

由于可生产用于降解结晶纤维素进行糖化的各种纤维素酶或半纤维素酶并可将这些酶大量分泌至细胞外，纤维素的酶糖化广泛采用曲霉属和木霉属等丝状菌。

此外，也进行了通过异种株表达这些丝状菌的纤维素酶的尝试，非专利文献1中揭示了通过编码作为丝状菌之一的棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)的β-葡糖苷酶Ⅰ(BGLⅠ)的基因对作为出芽酵母的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)进行转化，使所得的转化体表达了这些酶。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1:G.Tanaka等,Biosci.Biotechnol.Biochem.,62(8),1615-1618,1998.

发明的概要

发明所要解决的技术问题

然而，酶糖化法的情况下，存在下述问题：如果葡萄糖随着基于酶的纤维素的水解反应进行而在反应体系内积聚，积聚的葡萄糖会抑制β-葡糖苷酶，纤维二糖积聚，进而积聚的纤维二糖抑制内切葡聚糖酶和纤维二糖水解酶，结果纤维素无法完全降解。因此，希望β-葡糖苷酶高功能化。

另一方面，与曲霉属和木霉属相比，裂殖酵母属酵母的基因分析更深入，具有确立了各种有用的变异株和基因导入用载体、适合于蛋白质的工业化大量生产的优点，但裂殖酵母属酵母不具有固有的β-葡糖苷酶基因，无法对纤维二糖进行同化。

非专利文献1中，完全没有提到使出芽酵母生产的β-葡糖苷酶的葡萄糖抑制。

于是，本发明的目的在于提供可生产β-葡糖苷酶的裂殖酵母属酵母的转化体及其制造方法。

解决技术问题所采用的技术方案

本发明人为了解决上述课题而进行了认真研究，结果发现通过采用染色体中具有来源于丝状菌的编码β-葡糖苷酶的结构基因序列等或具有这些序列作为染色体外基因的裂殖酵母属酵母的转化体，可解决上述课题，从而完成了本发明。