[发明专利]具有IL33N端结构域缺失的鼠炎症模型

说明书

技术领域

本发明涉及在IL-33基因的N端结构域中具有缺陷的非人动物。本文还提供所述非人动物作为炎性疾病的体内模型的用途，尤其是用在筛选抗炎化合物的方法中，和用于评估和优化给定的抗炎化合物的药理性质的方法。

背景技术

白细胞介素33（IL-33）细胞因子是白细胞介素1（IL-1）家族的最新成员。由于其细胞核定位，它最初被描述为“来自毛细血管后微静脉的核因子”。IL-33主要由成纤维细胞和上皮、内皮和气道平滑肌细胞表达。IL-33是IL-1受体相关蛋白质ST2的配体。ST2受体在几乎所有先天性免疫细胞（肥大细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、自然杀伤（NK）细胞和巨噬细胞）中以及在NK T和T辅助（Th）2细胞中表达。IL-33与靶细胞上的ST2的相互作用可以触发促炎Th1、Th2和Th17细胞因子的表达和分泌、以及参与Th1、Th2和先天性免疫效应子功能的趋化因子的表达（公开的论文和Hicks等人正在准备的手稿）。IL-33通过其促炎细胞因子结构域与其特异性表面受体结合。此外，IL-33还具有N端结构域，其含有典型的DNA结合性螺旋-转角-螺旋基序。以其细胞核未切割形式，IL-33与异染色质中的组蛋白2A和2B相互作用，促进染色质压缩且充当潜在的转录阻遏物。有证据强烈地支持IL-33类似于其他染色质相关细胞因子（IL-1α和HMGB1），所述细胞因子看起来发挥双重功能，即，在核中调节转录阻遏、和经由经典受体发信号以用作有力的促炎细胞因子。因此，已提出，类似于HMGB1，IL-33可以充当‘警报素（alarmin）’——属于更大的损伤相关分子模式（DAMP）分子家族。

发明内容

IL-33/ST2轴在人炎性疾病的病理生理学中起关键作用，这由其在患病组织中的高水平表达所证实。升高水平的IL-33和/或其可溶性受体ST2在类风湿性关节炎（RA）、炎性肠病（IBD）、牛皮癣和溃疡性结肠炎、急性嗜酸性粒细胞肺炎、严重哮喘、特发性肺纤维化、肝纤维化疾病、特应性皮炎、系统性硬化病、自身免疫和创伤患者中观察到。类似于其在人中的作用，IL-33/ST2轴已显示在鼠炎症模型中是关键的。IL-33恶化胶原诱发性关节炎（CIA）、变应性结膜炎和实验性自身免疫性脑膜炎（EAE）。用抗体中断IL-33/ST2信号传导已显示对于变应性气道炎症和博来霉素诱发的肺损伤的消减是有利的。近来还已显示IL-33在慢性肠炎症的IBD小鼠模型中是上调的（Oboki等人，PNAS2010107（43）18581-18586）。该非人动物可以是任何非人动物。优选地，非人动物是哺乳动物，更优选地啮齿类动物例如大鼠或小鼠，最优选地非人动物是小鼠。在优选实施方案中，所述非人动物是小鼠，并且IL-33基因的N端缺失包括在IL-33基因的N端的整个DNA结合结构域的缺失。优选地，在该小鼠中所述IL-33基因N端缺失包括IL-33基因的表达产物的氨基酸1-67的缺失。

就该N端IL-33缺失而言，该非人动物可以是杂合或纯合的。优选地，非人动物就N端IL-33缺失而言是杂合的。

根据本发明在IL-33基因的N端具有缺陷的非人动物展示出炎性疾病的典型特征。例如，根据本发明的小鼠具有特征，如直至约3-4月龄前的正常出生率和生长，随后在耳中的出血性损害和在胸腔中重复观察到的大凝块、较小的尺寸、和一般疾病状况。在病理学检查时，这些小鼠显示出多器官炎症，包括慢性、多病灶心肌炎；伴有肠壁扩张的慢性、化脓性、强回肠炎；慢性输尿管炎（utreteritis）伴显著肾积水和肾萎缩、肺中的中等多病灶和血管周浸润，脾增生以及免疫器官、肺和小肠中的嗜酸性粒细胞和巨噬细胞的强扩张。