[发明专利]局部皮肤制剂

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2010年8月27日提交的U.S.S.N.61/377,803和2010年12月9日提交的U.S.S.N.61/421,516的优先权。

发明领域

本发明涉及用于人受试者皮肤的修复、保养和/或长期加强的局部制剂。

发明背景

皮肤品质随年龄、损伤、日光曝晒和其它环境因素以及(有时)疾病或自身免疫病症而衰退。许多世纪以来，已经使用了各种各样的材料，从泥浆和草药混合物、动物脂肪到更近代的乳液、洗剂、乳膏、凝胶和生物制剂。这些材料中许多不含药物活性剂，而是依靠相对惰性的物质补水和润滑皮肤的特性。一般只有制剂在皮肤上才持续产生益处。

已经将许多药物活性剂与洗剂、凝胶、乳膏、溶液和喷雾剂混合用于局部涂覆。实例包括减轻炎症的可的松和抗组胺药、治疗感染的抗生素、抗真菌剂、止痒和抗干燥剂。一些包括治疗衰老色斑的漂白剂和去除毛发的化学品。这些制剂对特定的活性成分是非常专一的而对恢复皮肤品质或减轻衰老影响没有作用。

近年来开发了局部生物制剂。它们包括含有诸如细胞因子和生长因子、胶原和其它胞外基质材料及补水化合物(如多羟基酸)等药剂的制剂。大多数情况下效果局限于生物制剂的特定作用。

其它生物制剂含有诸如以下等活性成分的不确定的混合物：生长因子、胞外基质材料和细胞培养基中发现的其它活性剂，例如，如Mehta等在J Drugs Dermatol.2008,Sep;7(9):864-71中和Naughton等在2009年5月14日公布的美国专利申请20090123503中描述的那些。然而，许多这些制剂的问题是它们不是来自施用所述混合物的人并且可能引起对外源蛋白质的免疫反应，这可能抵消所述培养基被提议的有益作用。

因此，本发明的目的是提供通过培养自体皮肤成纤维细胞获得的条件培养基的局部制剂，用于对患者局部施用来预防和治疗斑痕形成、减少衰老体征以及改善皮肤品质。

发明概述

开发了含有从自体成纤维细胞的培养物获得的条件培养基的自体局部制剂。不同于其它局部制剂，它是自体的，因为它仅仅来源于从将使用所述制剂的人获得的细胞。这避免了与来源于所述细胞的蛋白质的任何可能的反应。优选的制剂包括凝胶、乳膏、洗剂和软膏。

可对个体局部施用通过培养自体皮肤成纤维细胞获得的条件培养基的局部制剂来预防和治疗斑痕形成、减少衰老体征以及改善皮肤品质。

或者，可以使用一般群体使用的类似制造过程量产所述产品的异源型式。在这种型式的产品中，经过筛选的供体将提供组织用于扩增成纤维细胞和建立主细胞库(MCB)。对MCB进行适当的测试之后，将从主库扩增的细胞用于建立工作细胞库(WCB)，又将其扩增来制造用于在异源局部产品的制剂中使用的条件培养基。制造方法与自体方法相似，具有相同的应用并且局部产品的所有最终制剂将在相同的浓度范围内。

附图描述

图1是用于培养自体成纤维细胞的标准化制造方法流程图。

发明详述

成纤维细胞是皮肤中的特化细胞，它产生胶原和其它胞外基质组分。它们是发育成结缔组织的细胞，并且因此在人组织的发育中发挥关键作用，包括合成有助于皮肤质地和基质纤维(包括胶原)分泌的胞外基质组分的能力。胶原是构成真皮的主要组分之一的天然存在的蛋白质；它作为提供结构和支撑的纤维的基质而存在。已经开发出了自体成纤维细胞产品。所述细胞治疗产品由使用标准组织培养程序由每个个体自己皮肤的活检组织生长出的自体成纤维细胞的悬浮液组成。将借助于酶消化从组织分离的成纤维细胞扩增到足以用于注射到患者的靶标治疗区域中的量。所述自体局部治疗产品由从扩增的成纤维细胞获得的与合适的赋形剂配制用于局部施用的条件培养基组成。

这种方法也可以用于建立进行扩增以便产生用于配制量产局部产品的条件培养基的异源细胞系。

I.制剂。

本文中使用以下定义：

ATM分析测试方法

AZFICEL-T用于自体培养的成纤维细胞的USAN命名

大批收获物在低温保藏培养基中配制之前的最终收获之后的材料

CGMP现行良好生产规范

CS细胞层叠

DMEM杜贝尔科改良的依格氏培养基(Dulbecco’s Modification of Eagle’s Medium)

DMSO二甲亚砜

药物产品-注射剂经过洗涤并且在DMEM中再配制、装瓶并且准备好运至临床地点的材料