[发明专利]具有重组的基因表达调控序列的肿瘤特异性表达得到改善的基因运载体

权利要求书

1.一种基因表达调控序列，其特征在于，

包含：

（i）缺氧反应元件增强子序列，以及

（ii）E2F启动子序列；

上述E2F启动子位于上述缺氧反应元件增强子序列的下游，上述缺氧反应元件强子序列及E2F启动子协同促进相同基因的表达。

2.根据权利要求1所述的基因表达调控序列，其特征在于，上述E2F启动子序列重复2次-10次。

3.根据权利要求1所述的基因表达调控序列，其特征在于，上述缺氧反应元件增强子序列重复2次-20次。

4.根据权利要求1所述的基因表达调控序列，其特征在于，上述基因表达调控序列还包含端粒逆转录酶启动子序列。

5.根据权利要求4所述的基因表达调控序列，其特征在于，上述基因表达调控序列插入到重组腺病毒载体的E1区域，并从5’向3’方向包含缺氧反应元件序列、E2F启动子序列及端粒逆转录酶启动子序列。

6.根据权利要求5所述的基因表达调控序列，其特征在于，上述缺氧反应元件序列重复6次，上述E2F序列重复2次。

7.一种肿瘤特异性表达得到改善的基因运载体，其特征在于，

包含：

（a）权利要求1至6中任一项所述的基因表达调控序列；以及

（b）靶基因，其与上述基因表达调控序列有效地连接，该靶基因是用来表达的。

8.根据权利要求7所述的肿瘤特异性表达得到改善的基因运载体，其特征在于，上述基因运载体是质粒、重组腺病毒、腺相关病毒、逆转录病毒、慢病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒、痘病毒、聚合物、脂质体或类脂囊泡。

9.根据权利要求8所述的肿瘤特异性表达得到改善的基因运载体，其特征在于，上述基因运载体是重组腺病毒载体。

10.一种癌细胞特异性杀伤能力得到改善的重组腺病毒，其特征在于，

包含：

（a）腺病毒的末端反向重复序列；

（b）基因表达调控序列，其包含（i）缺氧反应元件增强子序列及（ii）E2F启动子序列，上述E2F启动子位于上述缺氧反应元件增强子序列的下游，上述缺氧反应元件增强子序列及E2F启动子协同促进相同基因的表达，以及

（c）治疗学转基因，其选自由与上述基因表达调控序列有效地连接的肿瘤抑制因子基因、抗原基因、细胞毒性基因、细胞增殖抑制基因、细胞凋亡基因及抗新生血管生成基因组成的组中。

11.根据权利要求10所述的癌细胞特异性杀伤能力得到改善的重组腺病毒，其特征在于，上述基因表达调控序列的E2F启动子序列重复2次-10次。

12.根据权利要求10所述的癌细胞特异性杀伤能力得到改善的重组腺病毒，其特征在于，上述基因表达调控序列的缺氧反应元件增强子序列重复2次-20次。

13.根据权利要求10所述的癌细胞特异性杀伤能力得到改善的重组腺病毒，其特征在于，上述基因表达调控序列还包含端粒逆转录酶启动子序列。

14.根据权利要求13所述的癌细胞特异性杀伤能力得到改善的重组腺病毒，其特征在于，上述基因表达调控序列插入到重组腺病毒载体的E1区域，并从5’向3’方向包含缺氧反应元件序列、E2F启动子序列及端粒逆转录酶启动子序列。

15.根据权利要求14所述的癌细胞特异性杀伤能力得到改善的重组腺病毒，其特征在于，上述缺氧反应元件序列重复6次，上述E2F序列重复2次。

16.根据权利要求10所述的癌细胞特异性杀伤能力得到改善的重组腺病毒，其特征在于，上述治疗学转基因是选自由载脂蛋白激酶8基因、胞嘧啶激酶基因、胸苷激酶基因及饰胶蛋白聚糖基因组成的组中的一种或两种以上的基因。

17.一种抗肿瘤组合物，其特征在于，

包含：

（a）权利要求10至16中任一项所述的重组腺病毒的治疗学有效量；以及

（b）药剂学上接受的载体。

18.根据权利要求17所述的抗肿瘤组合物，其特征在于，上述组合物还包含更昔洛韦作为有效成分。