[发明专利]高度灵敏的单克隆抗体残留物检测测定法

说明书

交叉引用相关优先权

本申请要求2010年9月13日提交的美国临时申请系列号61/382,413的优先权利益，其在此处完整地通过引用并入本文。

1.  介绍

本发明涉及用于在监测产物遗留时检测生物技术产物残留物和/或用于在生物技术产物的生产中清洁验证的组合物和高度灵敏的方法。具体而言，本发明涉及免疫测定法，其中一种或多种捕获抗体或其抗原结合片段用于检测与生物技术产物生产相关的残留物。

2.  发明背景

工艺设备清洁验证对于良好制造程序(Good Manufacturing Procedure , “GMP”)合规性是需要的，并且这样的合规性意在确保治疗性产物符合它们意在具有或代表具有的质量和纯度特征。作为GMP合规性的部分，总有机碳(“TOC”)测定已经常规地用于验证清洁程序对于去除生物技术产物残留物的效率。在个别生产运行之间以及当不同产物之间切换生产场所时可以采用TOC测定。然而，TOC测定的重要限制在于，检测限值< 0.1 ppm对于非常低剂量产物如某些抗体治疗剂(其最大允许的遗留限值低于TOC检测限值)监测产物遗留和/或清洁验证可能是不适合的。

除关于符合非常低剂量产物的问题以外，美国食品和药物管理局在2001年采用的关于人用药品注册的技术要求的协调的国际会议(International Conference On Harmonization Of Technical Requirements For Registration Of Pharmaceuticals For Human Use, “ICH”)文件ICH Q7A以及加拿大卫生部指南-0028，都推荐开发用于监测产物遗留和/或清洁验证的活性药物成分(“API”)特异性测定。因为TOC测定不是API特异性的，而是无论来源地测量总有机碳，所以它不符合这些推荐。

鉴于对于TOC测定的固有限制，更灵敏且API特异性的测定作为当监测产物遗留和/或用于清洁验证时检测生物技术产物残留物的可替代或补充的方法将是期望的。本发明通过引入用于检测痕量的核酸或蛋白残留物包括单克隆抗体残留物的一般分析测定(其可以用于监测产物遗留和/或用于清洁验证)来满足该需要。

3.  发明概述

在某些实施方案中，本发明涉及用于检测生物技术产物残留物的方法，其中将测试样品与包含捕获抗体或其抗原结合片段的基质接触，并且抗体 - 抗原复合物的检测指示存在生物技术产物残留物。

在某些实施方案中，本发明涉及用于检测生物技术产物残留物的方法，其中将测试样品与包含捕获抗体或其抗原结合片段的基质接触，并且抗体 - 抗原复合物的检测指示存在生物技术产物残留物，其中通过监测能够结合抗体 - 抗原复合物的标记的检测抗体的结合来实??现抗体 - 抗原复合物的检测。

在某些实施方案中，本发明涉及用于检测生物技术产物残留物的方法，其中将测试样品与包含捕获抗体或其抗原结合片段的基质接触，并且抗体 - 抗原复合物的检测指示存在生物技术产物残留物，其中生物技术产物残留物的存在指示产物遗留。

在某些实施方案中，本发明涉及用于检测生物技术产物残留物的方法，其中将测试样品与包含捕获抗体或其抗原结合片段的基质接触，并且抗体 - 抗原复合物的检测指示存在生物技术产物残留物，其中生物技术产物残留物的存在指示清洁过程不足。

在某些实施方案中，本发明涉及用于检测生物技术产物残留物的方法，其中将测试样品与包含捕获抗体或其抗原结合片段的基质接触，并且抗体 - 抗原复合物的检测指示存在生物技术产物残留物，其中所述抗原源自核酸产物。

在某些实施方案中，本发明涉及用于检测生物技术产物残留物的方法，其中将测试样品与包含捕获抗体或其抗原结合片段的基质接触，并且抗体 - 抗原复合物的检测指示存在生物技术产物残留物，其中所述抗原源自酶；肽激素；多克隆抗体；人单克隆抗体；人源化单克隆抗体；嵌合单克隆抗体；单链抗体；Fab抗体片段；F(ab')2抗体片段；Fd抗体片段；Fv抗体片段；分离的CDR；双抗体；和免疫粘附分子。

在某些实施方案中，本发明涉及用于检测生物技术产物残留物的方法，其中将测试样品与包含捕获抗体或其抗原结合片段的基质接触，并且抗体 - 抗原复合物的检测指示存在生物技术产物残留物，其中所述抗原源自抗体产物。