[发明专利]β-葡糖苷酶变体及其编码多核苷酸

权利要求书

1.一种β-葡糖苷酶变体，其在对应于SEQ ID NO:2的成熟多肽的位置89，91，100，140，186，283，456，和512的一个或多个(例如几个)位置包含取代，其中所述变体具有β-葡糖苷酶活性。

2.权利要求1的变体，其为亲本β-葡糖苷酶的变体，选自下组：

(a)多肽，其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%，至少82%，至少83%，至少84%，至少85%，至少86%，至少87%，至少88%，至少89%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%序列同一性；

(b)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸在高严格条件下或非常高严格条件下与以下杂交：(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列，(ii)其cDNA序列，或(iii)或(i)或(ii)的全长互补链；

(c)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列或其cDNA序列具有至少80%，例如至少81%，至少82%，至少83%，至少84%，至少85%，至少86%，至少87%，至少88%，至少89%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%序列同一性；和

(d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的片段，其具有β-葡糖苷酶活性。

3.权利要求2的变体，其与亲本β-葡糖苷酶的氨基酸序列具有至少80%，例如至少81%，至少82%，至少83%，至少84%，至少85%，至少86%，至少87%，至少88%，至少89%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，但少于100%序列同一性。

4.权利要求1-3任一项的变体，其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80%，例如至少81%，至少82%，至少83%，至少84%，至少85%，至少86%，至少87%，至少88%，至少89%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，但少于100%序列同一性。

5.权利要求1-4任一项的变体，其包含一个或多个选自下组的取代：L89M，G91L，F100D，I140V，I186V，S283G，N456E，和F512Y。

6.权利要求1-4任一项的变体，其包含如下取代或由如下取代组成：L89M，G91L，F100D，I140V，I186V，S283G，N456E，和F512Y。

7.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求1-6任一项的变体。

8.一种宿主细胞，其包含权利要求7的多核苷酸。

9.一种产生变体的方法，其包括：

(a)在适于表达所述变体的条件下培养权利要求8的宿主细胞；和

(b)回收所述变体。

10.一种转基因植物、植物部分或植物细胞，其用权利要求7的多核苷酸转化。

11.一种产生权利要求1-6任一项的变体的方法，其包括：

(a)在有助于产生所述变体的条件下培养包含编码所述变体的多核苷酸的转基因植物或植物细胞；和

(b)回收所述变体。

12.一种用于获得变体的方法，其包括：将在对应于SEQ ID NO:2的成熟多肽的位置89，91，100，140，186，283，456，和512的一个或多个位置的取代导入亲本β-葡糖苷酶，其中所述变体具有β-葡糖苷酶活性；和回收所述变体。

13.一种用于降解或转化纤维素材料的方法，其包括在权利要求1-6任一项的变体的存在下用酶组合物处理所述纤维素材料。

14.权利要求13的方法，其进一步包括回收经降解的纤维素材料。

15.权利要求13或14的方法，其中所述酶组合物包含一种或多种选自下组的酶：纤维素酶、具有纤维素分解增强活性的多肽、半纤维素酶、棒曲霉素、酯酶、漆酶、木质素分解酶、果胶酶、过氧化物酶、蛋白酶和膨胀素。