[发明专利]葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的高产量、灵敏检测

权利要求书

1.一种检测生物样品中G6PDH的量的高产量方法，所述方法包括：

使生物样品与G6P和NADP在表面活性剂和缓冲剂存在下在合适的条件下反应，形成6-磷酸葡萄糖酸；

淬灭所述生物样品，形成淬灭样品；以及

通过质谱分析来检测所述淬灭样品中6-磷酸葡萄糖酸的存在或量，

其中所述淬灭样品中6-磷酸葡萄糖酸的量与所述生物样品中G6PDH的量相关。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述淬灭是使用酶变性剂来实现的。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述质谱分析是串联质谱分析。

4.根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述质谱分析是使用配备有热辅助型电喷雾电离探针的质谱仪来实现的。

5.根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述质谱分析是使用配备有逆相液相色谱柱的质谱仪来实现的。

6.根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述检测在约5分钟内进行。

7.根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述检测在约3分钟内进行。

8.根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述方法允许检测约0.01毫单位或更少的G6PDH。

9.根据前述权利要求中任一权利要求所述的方法，其中所述检测实质上不受温度波动所影响。

10.一种检测个体的G6PDH缺乏的方法，所述方法包括：

通过质谱分析来测定从个体得到的生物样品中G6PDH的量；以及

将所述生物样品中G6PDH的量与适当对照值进行比较，

其中当所述样品中G6PDH的量小于所述适当对照值时检测到G6PDH缺乏。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述个体是新生儿或婴儿。

12.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述个体是孕妇。

13.根据权利要求10到12中任一权利要求所述的方法，其中所述样品中G6PDH的量比所述对照值小10％指示所述个体的G6PDH缺乏。

14.根据权利要求10到13中任一权利要求所述的方法，其中所述样品中G6PDH的量比所述对照值小25％指示所述个体的G6PDH缺乏。

15.根据权利要求10到14中任一权利要求所述的方法，其中所述样品中G6PDH的量比所述对照值小50％指示所述个体的G6PDH缺乏。

16.一种诊断个体的急性溶血性贫血的方法，所述方法包括：

根据权利要求10所述的方法检测个体的G6PDH缺乏，

其中所述个体的G6PDH缺乏指示所述个体的急性溶血性贫血。

17.根据权利要求16所述的方法，其中样品中G6PDH的量比对照值小25％指示所述个体的急性溶血性贫血。

18.一种诊断个体的子痫前期的方法，所述方法包括：

根据权利要求10所述的方法检测个体的G6PDH缺乏，

其中所述个体的G6PDH缺乏指示所述个体的子痫前期。

19.根据权利要求18所述的方法，其中样品中G6PDH的量比对照值小25％指示所述个体的子痫前期。

20.一种用于个体的由子痫前期或急性溶血性贫血引起的死亡率和/或发病率增加的预后方法，其包括：

根据权利要求10所述的方法检测个体的G6PDH缺乏，

其中生物样品中G6PDH的量比所述对照值小50％或更小指示所述个体的死亡率和/或发病率增加的预后。

21.根据权利要求10到20中任一权利要求所述的方法，其中所述适当对照值是基于正常群体中的G6PDH水平的对照值。