[发明专利]人类多能性类胚胎干细胞先驱细胞

说明书

技术领域

本发明涉及一群前驱/先驱细胞，其特别富集有多能性类胚胎干细胞间叶共同前驱细胞（mesenchymal common progenitor cells，MCPCs）群，亦涉及富集这些细胞的方法。

背景技术

在再生医学中，鉴别出高度安全且有效的干细胞来源，为发展生物材料，用以修复及更新损坏及具缺陷的组织的第一步。人类胚胎干细胞（hESCs）可保持为未分化的状态；但当将其培养于适当环境中时，便会开始自发地分化为多种不同型态的细胞。这一重要的启示，在于胚胎干细胞的培养可作为生产多种不同细胞型态的来源。然而，这种方法却非有效率的方法，原因在于仍须控制胚胎干细胞的分化（参阅：干细胞：科学进度及未来研究方向（Stem Cells:Scientific Progress and Future Research Directions）。Department of Health and Human Sevice，2001年6月）。

间叶干细胞或MSCs为多能性干细胞，可分化为多种不同的细胞型态。MSCs可从胎盘、脂肪组织、肺、骨髓、牙髓及血液分离。已知MSCs于活体外或活体内可分化的细胞型态包括成骨细胞、软骨细胞、肌细胞、脂肪细胞及β-胰岛细胞。从骨髓中可发现稀少的MSCs，在10,000有核细胞中占约1个。虽然该MSCs并非永生的，但这些细胞在培养时，具可增殖数倍的能力，且仍维持其生长及分化多向的潜能。Pittenger等人（科学284,143(1999)）公开了分离的间叶（干）细胞都一致表达SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、CD124及其它许多表面蛋白；然而这些间叶细胞不表达造血细胞系的其它标记，包括脂多醣体受器CD14、CD34，及白血球共同抗原CD45。MSCs可通过许多分子（包含CD44及CD105）的表达以及不表达造血性标记CD34、CD45及CD14来鉴定。

报导指出，羊膜的间叶基质细胞及人类绒毛膜的间叶基质细胞可从胎盘中分离。这些细胞的表面抗原表达，如下表A所示，显示其无法表达CD45、CD34、CD14及HLA-DR（Parolini等人，干细胞26:300-311,2008）。

表A.羊膜的间叶基质细胞及人类绒毛膜的间叶基质细胞于2-4代时，其特定抗原的表达

阳性(≥95%)阴性(≤2%)CD90CD45CD73CD34CD105CD14 HLA-DR

Caplice（US7,790,453B2）教示衍生自血液的成体平滑肌先驱细胞为CD34阳性的。然而，Caplice所公开的平滑肌先驱细胞并没有将其特征化描述为间叶基质干／先驱细胞，且这些先驱细胞具有局限的分化潜能。

Lucas等人（US7,259,011B2）教示表达CD13、CD34、CD56及CD117的分离的人类多能的成体干细胞（PPASCs）。根据Lucas等人，该PPASCs不会表达CD10、CD14及阶段特异性胚胎抗原SSEA2。该PPASCs也未被特征化描述为间叶基质干／先驱细胞。

Hariri（US7,468,276B2）教示分离的人类胎盘干细胞为OCT4⁺及CD34⁺。由Hariri公开的人类胎盘干细胞为SSEA3^-及SSEA4^-。由Hariri公开的人类胎盘干细胞未被特征化描述为间叶基质干／先驱细胞。