[发明专利]具有内肽酶活性的多肽以及编码其的多核苷酸在审

专利信息
申请号: 201180058129.2 申请日: 2011-09-30
公开(公告)号: CN103534349A 公开(公告)日: 2014-01-22
发明(设计)人: P·R·奥斯特加德;C·P·索恩克森;T·霍夫;G·B·林格莱夫 申请(专利权)人: 诺维信公司
主分类号: C12N9/50 分类号: C12N9/50;A61K38/01;C12P21/06
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人: 史悦
地址: 丹麦*** 国省代码: 丹麦;DK
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摘要:
搜索关键词: 具有 肽酶 活性 多肽 以及 编码 多核苷酸
【权利要求书】:

1.一种具有内肽酶活性的分离的多肽,其选自下组:

(a)多肽,其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少70%序列同一性;

(b)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在低严格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,(ii)包含SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补链;

(c)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少70%序列同一性;

(d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的包含一个或多个(几个)氨基酸的取代、缺失和/或插入的变体;和

(e)(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的具有内肽酶活性的片段。

2.权利要求1的多肽,其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少75%,至少80%,至少85%,至少90%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%或100%的序列同一性。

3.权利要求1或2的多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在低-中等严格条件下,中等严格条件下,中-高严格条件下,高严格条件下,或非常高的严格条件下,与以下杂交:(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,(ii)包含SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补链。

4.权利要求1-3中任一项的多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少75%,至少80%,至少85%,至少90%,至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,至少99%或100%的序列同一性。

5.权利要求1-4中任一项的多肽,其包含SEQ ID NO:2或由SEQ ID NO:2组成。

6.权利要求1-5中任一项的多肽,其由质粒ExpVec8中包含的多核苷酸编码,所述质粒包含于大肠杆菌DSM23706中。

7.包含权利要求1-6中任一项的多肽的组合物。

8.一种产生权利要求1-6中任一项的多肽的方法,包括:

(a)在有助于多肽生产的条件下,培养包含编码权利要求1-6中任一项的多肽的多核苷酸的重组宿主细胞,该多核苷酸与指导所述多肽产生的一个或多个调控序列可操作连接;和

(b)回收所述多肽。

9.权利要求1-6中任一项的多肽或权利要求7的组合物用于制备蛋白水解物的用途。

10.一种制备蛋白水解物的方法,包括:

(a)提供包含待水解的蛋白的溶液;

(b)将权利要求1-6中任一项的多肽或权利要求7的组合物添加至所述溶液;和

(c)获得蛋白水解物。

11.权利要求10的方法,其中所述待水解的蛋白是食品蛋白。

12.来源于细菌的胰蛋白酶样内肽酶用于制备食品蛋白水解物的用途。

13.一种制备食品蛋白水解物的方法,包括:

(a)提供包含待水解的食品蛋白的溶液;

(b)将来源于细菌的胰蛋白酶样内肽酶添加至所述溶液;和

(c)获得食品蛋白水解物。

14.权利要求13的方法,其中所述胰蛋白酶样内肽酶是分离的胰蛋白酶样内肽酶。

15.权利要求13-14中任一项的方法,其中所述胰蛋白酶样内肽酶源自放线菌。

16.权利要求13-15中任一项的方法,其中所述蛋白是乳蛋白。

17.权利要求13-16中任一项的方法,其中所述蛋白是乳清蛋白。

18.权利要求13-17中任一项的方法,其中所述胰蛋白酶样内肽酶是与SEQ ID NOs:2、5或6的任一者的成熟多肽具有至少40%序列同一性的多肽。

19.权利要求13-18中任一项的方法,其中所述胰蛋白酶样内肽酶是与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少70%序列同一性的多肽。

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