[发明专利]具有内肽酶活性的多肽以及编码其的多核苷酸

权利要求书

1.一种具有内肽酶活性的分离的多肽，其选自下组：

(a)多肽，其与SEQ ID NO：2的成熟多肽具有至少70％序列同一性；

(b)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸在低严格条件下与以下杂交：(i)SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列，(ii)包含SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补链；

(c)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列具有至少70％序列同一性；

(d)SEQ ID NO：2的成熟多肽的包含一个或多个(几个)氨基酸的取代、缺失和／或插入的变体；和

(e)(a)、(b)、(c)或(d)的多肽的具有内肽酶活性的片段。

2.权利要求1的多肽，其与SEQ ID NO：2的成熟多肽具有至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，至少99％或100％的序列同一性。

3.权利要求1或2的多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸在低-中等严格条件下，中等严格条件下，中-高严格条件下，高严格条件下，或非常高的严格条件下，与以下杂交：(i)SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列，(ii)包含SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补链。

4.权利要求1-3中任一项的多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO：1的成熟多肽编码序列具有至少75％，至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，至少99％或100％的序列同一性。

5.权利要求1-4中任一项的多肽，其包含SEQ ID NO：2或由SEQ ID NO：2组成。

6.权利要求1-5中任一项的多肽，其由质粒ExpVec8中包含的多核苷酸编码，所述质粒包含于大肠杆菌DSM23706中。

7.包含权利要求1-6中任一项的多肽的组合物。

8.一种产生权利要求1-6中任一项的多肽的方法，包括：

(a)在有助于多肽生产的条件下，培养包含编码权利要求1-6中任一项的多肽的多核苷酸的重组宿主细胞，该多核苷酸与指导所述多肽产生的一个或多个调控序列可操作连接；和

(b)回收所述多肽。

9.权利要求1-6中任一项的多肽或权利要求7的组合物用于制备蛋白水解物的用途。

10.一种制备蛋白水解物的方法，包括：

(a)提供包含待水解的蛋白的溶液；

(b)将权利要求1-6中任一项的多肽或权利要求7的组合物添加至所述溶液；和

(c)获得蛋白水解物。

11.权利要求１0的方法，其中所述待水解的蛋白是食品蛋白。

12.来源于细菌的胰蛋白酶样内肽酶用于制备食品蛋白水解物的用途。

13.一种制备食品蛋白水解物的方法，包括：

(a)提供包含待水解的食品蛋白的溶液；

(b)将来源于细菌的胰蛋白酶样内肽酶添加至所述溶液；和

(c)获得食品蛋白水解物。

14.权利要求13的方法，其中所述胰蛋白酶样内肽酶是分离的胰蛋白酶样内肽酶。

15.权利要求13-14中任一项的方法，其中所述胰蛋白酶样内肽酶源自放线菌。

16.权利要求13-15中任一项的方法，其中所述蛋白是乳蛋白。

17.权利要求13-16中任一项的方法，其中所述蛋白是乳清蛋白。

18.权利要求13-17中任一项的方法，其中所述胰蛋白酶样内肽酶是与SEQ ID NOs：2、5或6的任一者的成熟多肽具有至少40％序列同一性的多肽。

19.权利要求13-18中任一项的方法，其中所述胰蛋白酶样内肽酶是与SEQ ID NO：2的成熟多肽具有至少70％序列同一性的多肽。