[发明专利]采绒革盖菌提取物及其制备方法和用途

说明书

相关专利申请的交叉引用

本申请要求2010年10月6日提交的美国临时申请流水号61/390,279和2011年1月14日提交的美国临时申请流水号61/432,853的优先权，所述申请全文均以引用的方式纳入本文。

背景技术

采绒革盖菌（Coriolus versicolor），还称为杂色蘑菇（Agaricus versicolor）、杂色牛肝菌（Boletus versicolor）、白云山芝多糖（Polyporus versicolor）、杂色革盖菌（Polystictus versicolor）、杂色茯苓（Poria versicolor）、杂色栓菌（Trametes versicolor）、云芝（Yun-Zhi，中国）、云芝（Kawaratake，日本）和―火鸡尾‖（turkey tail，北美），其属于担子菌纲，多孔菌科。其广泛分布于世界各地，在亚洲、欧洲和北美的多树木的温带中已经鉴定了多于120种不同的株系。

采绒革盖菌的药用价值由中国明朝（公元1368-1644年）的李时珍首先记录于《本草纲目》（Compendium of Materia Medica，Compendium Medica）。根据《本草纲目》的记载，如果经常食用采绒革盖菌（云芝），可以补气、保持最佳体重、延年益寿并避免不必要的衰老。人们还认为采绒革盖菌对肝和脾功能有保护作用（3），并已被用于治疗多种与肝功能障碍和呼吸道感染有关的症状。在中国以及日本，采绒革盖菌被干燥、磨碎并制成茶。没有报道显示采绒革盖菌在长期服用时会有毒性作用（24）。

据报道，采绒革盖菌具有免疫调节（4）、抗肿瘤（4）、抗微生物（5）和抗病毒作用（6,7）。这些药理学作用可能主要是由多糖肽（PSP）（例如云芝多糖K（PSK））产生的（4）。

特别地，采绒革盖菌被报告可增强抵御病原体和疾病的免疫系统。体外实验显示，采绒革盖菌的水性提取物可有效地激活免疫细胞，包括T淋巴细胞（8-14）、B淋巴细胞（9,13）、单核细胞/巨噬细胞（9,12,13,15）、骨髓细胞（13）、自然杀伤细胞和淋巴细胞激活的杀伤细胞（8,9）。另外，据报道，采绒革盖菌提取物可增强抗体和多种细胞因子（包括白细胞介素例如IL-2和IL-6、干扰素和肿瘤坏死因子的产生（9）。体内研究也证明，采绒革盖菌水性提取物有助于恢复接受化疗的患者中的免疫应答（5,14,16,17），并有助于减少由抗癌药物导致的免疫抑制。

另外，采绒革盖菌可抑制肿瘤细胞的生长、迁移和转移（18）。研究已经证明采绒革盖菌提取物在体外可抑制癌细胞的生长，所述癌细胞包括胃癌细胞（gastric cancer cell）（例如，7907）、肺癌细胞（例如，SPC）、白血病细胞（例如，MCL）、淋巴瘤细胞（例如，SLY）、人白血病细胞（例如，HK-60）、肝癌细胞（例如，SMMU-7721）和胃癌细胞（stomach cancer cell）（例如，SCG-7901）（16,19-23）。所述提取物还可被用于预防食道癌、结肠癌、乳癌、肝癌、肺癌和膀胱癌（9）。虽然采绒革盖菌提取物显示出强有力的抗肿瘤活性，其对正常细胞几乎没有细胞毒性作用（25）。

虽然采绒革盖菌的经验性使用有很长的历史，但对其发挥药理学作用的确切机制仍然了解有限。另外，采绒革盖菌的许多生物学活性化学组分还没有被鉴定。因此，需要阐明采绒革盖菌的药物机制，以通过这种方式来开发新的治疗组合物和方法。另外，需要开发更加有效和方便的提取方法，以用于放大采绒革盖菌提取物的生产，并用于鉴定其用于治疗用途的生物学活性化学组分。

发明内容

本发明提供了有效且方便的方法，用于制备用于治疗用途的采绒革盖菌提取物。在一个实施方案中，本发明提供了一种用于制备采绒革盖菌提取物和/或用于从采绒革盖菌中分离生物学活性化学组分的方法，所述方法包括如下步骤：

a)提供足够量的采绒革盖菌原材料；

b)在约15℃至约30℃的温度下用极性溶剂提取所述采绒革盖菌原材料以得到采绒革盖菌提取物和残留物，其中步骤b)进行一次或多于一次；

c)回收所述采绒革盖菌提取物。

优选地，所述采绒革盖菌提取物包含生物学活性化学组分，包括多糖肽（PSP）（例如云芝多糖K（PSK））或其他生物活性小分子。在一个实施方案中，所述采绒革盖菌提取物可被进一步地蒸发以产生固体或半固体组合物。