[发明专利]肽

说明书

技术领域

本发明涉及具有ACE-抑制特性的肽、其变异体、包含其的组合物及其用途，特别是医学用途例如治疗高血压的用途。

背景技术

高血压是中风、心脏病发作、心力衰竭和动脉瘤的风险因素之一，并且是慢性肾衰竭的主要原因。即使中等水平的动脉血压升高都会导致预期寿命缩短。

高血压可通过靶向于血管紧张素I-转化酶(ACE)而被治疗。ACE是一种参与到身体的肾素-血管紧张素系统(RAS)的酶。它是一种外肽酶，可以将十肽的血管紧张素I催化转化成八肽的血管紧张素II。血管紧张素II引起血管收缩，导致血压升高。它也刺激醛固酮从肾上腺皮质处释放。醛固酮促进了肾脏中末梢肾单位的钠潴留，这也导致了血压的上升。

ACE抑制剂被用于在患有高血压或糖尿病的人中控制血压、治疗心力衰竭、预防中风以及预防肾损伤等。它们同样可以提高心脏病发作后的生存率。常用的ACE抑制剂包括贝那普利（洛汀新）、卡托普利（开搏通）、依那普利（Vasotec）、福辛普利（蒙诺）、赖诺普利（Prinivil，捷赐瑞）、莫西普利（Univasc）、培哚普利（Aceon）、喹那普利（Accupril）、雷米普利（Altace）和群多普利（Mavik）。这些药物通常具有不希望的副作用和/或它们的药效不足，因此对于其他ACE抑制剂仍有需要。

许多不同的肽均被发现具有ACE抑制活性（Vercruysse等,September 2005,Journal of Agricultural and Food Chemistry A-J），并且对其他具有ACE抑制活性的肽仍有需要。

发明内容

本发明的发明人已经鉴定出一种肽具有特别良好的ACE抑制活性。所述肽具有序列FSY，其中F表示苯丙氨酸，也可以表示为Phe，S表示丝氨酸，也可以表示为Ser，以及Y表示酪氨酸，也可以表示为Tyr。因此，本发明的一个方面提供了一种肽，包括SEQ ID NO:1(FSY)或由SEQ ID NO:1(FSY)组成。

本发明的发明人也对上述肽的一种具有序列FTY的变异体进行了测定，所述变异体也具有特别良好的ACE抑制活性。T表示苏氨酸，也可以表示为Thr。因此，本发明在另方面提供了一种肽，包括SEQ ID NO:2(FTY)或由SEQ ID NO:2(FTY)组成。

在本说明书中“FSY/FTY”用于表示肽可以具有序列FSY或FTY。

所述肽可以包括至少3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、30、40或50个氨基酸，以及优选不多于50、40、30、25、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5或4个氨基酸，例如3-25、3-15、3-10、3-8、3-7、3-6、3-5或3-4个氨基酸，优选由4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18或20个氨基酸组成，最优选由3个氨基酸组成。“由多个氨基酸组成”指的是所含有的氨基酸的个数不超过所列举的数字，但这一表达并不排除所述肽包括其他非肽部分的可能性。例如，如下文中所讨论的，所述肽可以被磷酸化或可包括C-末端帽。

因此，所述肽具有核心氨基酸序列FSY或FTY。在本说明书中使用的术语“核心氨基酸序列”指的是一段氨基酸序列，所述氨基酸序列可以起始于肽的N-末端，可以是肽的内部序列，可以在肽的C-末端终止，或者可以起始于肽的N-末端并终止于肽的C-末端。核心序列的N-和/或C-末端侧的氨基酸被称之为“侧翼”氨基酸。

所述FSY/FTY肽可以是重组体，即其可以从宿主细胞例如大肠杆菌中的异源性基因中表达并从中纯化出来。它可以从非重组体源获得，例如从天然生成该种肽的动物或植物样品中分离出来。它可以通过酶学或化学分解（例如水解）包含FSY/FTY序列的蛋白质而获得。肽合成的标准方法，例如固相合成，可被用于合成该种肽，Fmoc或Boc固相合成是优选的。

本发明因此还提供了一种生产分离的FSY/FTY肽的方法。所述方法可以包括上述的任何方法。优选地，所述方法包括将蛋白质的组合物水解生成水解产物并且将FSY/FTY肽从水解产物中分离的步骤。

本发明还提供了一种生产包含FSY/FTY肽的组合物的方法，所述方法包括水解含FSY/FTY基序的蛋白质以生成包含FSY/FTY肽的组合物。

除非另外声明，在本说明书中提及的任何生产方法均可以在纯蛋白质或在蛋白质的混合物上进行。蛋白质的混合物可以例如为包括虾（优选北极甜虾（Pandalus borealis））的头、尾和/或壳的虾处理废物。