[发明专利]温度稳定型β-吡喃糖苷酶

权利要求书

1.具有β-吡喃糖苷酶活性的多肽，其中所述多肽包含与SEQ ID NO.2具有至少71%，尽可能地至少75%，尽可能地至少80%，和优选地至少85%的序列同一性的氨基酸序列。

2.具有β-吡喃糖苷酶活性的多肽，其中所述多肽包含与SEQ ID NO.1具有至少70%，尽可能地至少75%，尽可能地至少80%，和优选地至少85%的序列同一性的氨基酸序列。

3.具有β-吡喃糖苷酶活性的多肽，其中所述多肽包含下述氨基酸序列：

（1）氨基酸序列，其与FgXyl3a的结构域1具有至少70%，尽可能地至少75%，尽可能地至少80%，和优选地至少85%的序列同一性，所述FgXyl3a的结构域1由包含SEQ ID NO.1的氨基酸残基13至381以及586至383的区域组成，以及

（2）氨基酸序列，其是家族3的糖苷水解酶（GHF3）的结构域2。

4.具有β-吡喃糖苷酶活性的多肽，其中所述多肽包含下述氨基酸序列：

（1）氨基酸序列，其是家族3的糖苷水解酶（GHF3）的结构域1，以及

（2）氨基酸序列，其与FgXyl3a的结构域2具有至少70%，尽可能地至少75%，尽可能地至少80%，和优选地至少85%的序列同一性，所述FgXyl3a的结构域2由包含SEQ ID NO.1的氨基酸残基382至585的区域组成。

5.根据前述权利要求中一项或多项的多肽，其中所述β-吡喃糖苷酶活性选自β-吡喃木糖苷酶活性、β-吡喃葡萄糖苷酶活性和这两种活性的组合。

6.根据前述权利要求中一项或多项的多肽，其具有β-吡喃木糖苷酶活性。

7.根据前述权利要求中一项或多项的多肽，其可以水解至少一个在下列底物中所包含的β-糖苷键：木二糖、木三糖、木四糖、木聚糖。

8.根据前述权利要求中一项或多项的多肽，其针对pNP-β-纤维二糖苷的活性相比于针对pNP-β-木二糖苷的活性而言为5%或更低。

9.根据权利要求2至8中一项或多项的多肽，其针对pNP-β-吡喃木糖苷的酶促活性在pH4.0至pH8.0的范围内，对此尽可能地在pH5.5至7.0的范围内，和优选地在pH6.2至6.8的范围内是最大的。

10.根据权利要求2至9中一项或多项的多肽，其最大的针对pNP-β-吡喃木糖苷的酶促活性在pH9.0下温育48小时后为未在pH9.0下进行温育的所述多肽的第二个级分的活性的至少50%，尽可能地至少60%，尽可能地至少70%，和优选地至少80%。

11.根据权利要求2至10中一项或多项的多肽，其针对pNP-β-吡喃木糖苷的酶促活性在60℃至100℃，尽可能地70℃至95℃，和优选地80℃至90℃的范围内是最大的。

12.根据权利要求2至11中一项或多项的多肽，其最大的针对pNP-β-吡喃木糖苷的活性在60℃下温育3小时后为未在相应温度下进行温育的所述多肽的第二个级分的活性的至少40%，优选地至少50%。

13.融合蛋白，其由根据前述权利要求中任一项的多肽和其他蛋白质的碳水化合物结合结构域形成。

14.融合蛋白，其由根据前述权利要求中任一项的多肽和第二多肽形成，所述第二多肽选自由下列组成的组中的一种或多种：信号肽、亲和标签、蛋白酶切割位点。

15.混合物，其包含根据前述权利要求之一的多肽，以及一种或多种果胶酶和/或一种或多种内切木聚糖酶和/或一种或多种β-葡萄糖苷酶和/或一种或多种β-葡聚糖酶和/或一种或多种纤维二糖水解酶和/或一种或多种β-木糖苷酶和/或一种或多种α-阿拉伯呋喃糖苷酶和/或一种或多种α-葡糖醛酸糖苷酶和/或一种或多种乙酰木聚糖酯酶。

16.编码根据权利要求1至14之一的多肽的核酸。

17.包含根据权利要求16的核酸的载体。

18.用根据权利要求17的载体转化的宿主细胞。