[发明专利]癌细胞的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及癌细胞的检测方法。

背景技术

日本专利第3834326号公报中公开了使用免疫微珠回收癌细胞后用抗体进行免疫染色等来检测的方法。日本特开2001-41959号公报中公开了通过使固定有特异性地结合癌细胞的配体的载体与含有癌细胞的液体接触而对载体上结合的癌细胞进行标记来检测癌细胞的方法。此外，还有利用细胞的大小与正常细胞分离后通过免疫染色进行检测的方法、通过密度梯度离心分离后进行免疫染色的方法等。另外，作为血液中含有的癌细胞的检测方法，例如，日本专利第3867968号公报中公开了使用腺病毒感染癌细胞使其表达荧光蛋白质而进行检测的方法。

发明内容

发明所要解决的问题

但是，对于日本专利第3834326号公报中记载的技术和其他使用免疫染色的方法而言，如果不表达抗原则无法进行检测，即使是检测时也需要预先确定靶抗原，并且只能检测带有该标靶的细胞。对于日本特开2001-41959号公报中公开的技术那样利用固定有特异性地结合癌细胞的配体的载体的方法而言，需要预先制备这样的载体。另外，对于日本专利第3867968号公报中记载的技术而言，为了感染病毒而需要进行培养，在荧光测定之前需要约24小时的时间。

因此，本发明的目的在于提供能够在短时间内简便地检测末梢血中的癌细胞的癌细胞检测方法。

用于解决问题的手段

本发明如下所述。

[1]一种癌细胞的检测方法，包括如下步骤：使含有被检细胞的含末梢血试样与标记用物质在体外接触，使所述标记用物质摄入到所述被检细胞内而对所述被检细胞进行标记、以及从所述被检细胞中检测出由所述标记用物质标记的程度强于含末梢血试样中的正常细胞的标记程度的细胞作为癌细胞。

[2]如[1]所述的检测方法，其中，所述标记用物质为用荧光物质标记的物质或荧光物质的前体物质，所述检测得到由所述荧光物质标记的所述被检细胞的荧光强度。

[3]如[1]或[2]所述的检测方法，其中，所述标记用物质为用荧光物质标记的物质或荧光物质的前体物质，所述检测得到选自由由所述荧光物质标记的所述被检细胞的平均荧光强度和总荧光强度组成的组中的至少一种荧光强度。

[4]如[1]～[3]中任一项所述的检测方法，其中，所述检测还基于由所述荧光物质标记的所述被检细胞的大小来进行。

[5]如[1]～[4]中任一项所述的检测方法，其中，所述标记用物质为选自由标记化的糖、标记化的氨基酸和摄入到细胞内后代谢成原卟啉9的物质组成的组中的至少一种物质。

[6]如[1]～[5]中任一项所述的检测方法，其中，所述标记用物质为标记化的糖和标记化的氨基酸。

[7]如[1]～[6]中任一项所述的检测方法，其中，所述标记用物质为所述标记化的糖，所述标记化的糖为标记化的单糖。

[8]如[1]～[7]中任一项所述的检测方法，其中，所述标记用物质为所述标记化的糖，所述标记化的糖为荧光标记的葡萄糖衍生物。

[9]如[1]～[8]中任一项所述的检测方法，其中，所述标记用物质为标记化的氨基酸，所述氨基酸为选自由天然氨基酸和非天然氨基酸组成的组中的至少一种氨基酸。

[10]如[1]～[9]中任一项所述的检测方法，其中，所述标记用物质为标记化的氨基酸，所述氨基酸为选自由中性氨基酸和酸性氨基酸组成的组中的至少一种氨基酸。

[11]如[1]～[10]中任一项所述的检测方法，其中，所述标记用物质为摄入到细胞内后代谢成原卟啉9的物质，所述物质为选自由氨基乙酰丙酸及其衍生物组成的组中的至少一种物质。

[12]如[1]～[11]中任一项所述的检测方法，其中，所述标记用物质为摄入到细胞内后代谢成原卟啉9的物质，所述物质为氨基乙酰丙酸及其衍生物，所述氨基乙酰丙酸及其衍生物为选自由它们的盐、它们的酯和它们的酯的盐组成的组中的至少一种物质。

[13]如[1]～[12]中任一项所述的检测方法，其中，含有所述被检细胞的所述含末梢血试样进行了溶血处理。

[14]如[1]～[13]中任一项所述的检测方法，其中，包括使细胞种类识别用抗体与含有所述被检细胞的所述含末梢血试样在体外接触的步骤。

[15]如[14]所述的检测方法，其中，所述细胞种类识别用抗体为选自由抗CD45抗体和抗CD34抗体组成的组中的至少一种抗体。