[发明专利]用于产生神经胶质细胞的群体的分化方法

权利要求书

1.一种产生哺乳动物神经外胚层的方法，所述方法包括：提供多能细胞；以及通过在激活素-nodal通路的一种或多种抑制剂和骨形态发生蛋白通路的一种或多种抑制剂存在下培养所述多能细胞来诱导所述多能细胞发育成神经外胚层。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述激活素-nodal通路的一种或多种抑制剂是SB431542。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述骨形态发生蛋白通路的一种或多种抑制剂选自dorsomorphin、LDN-193189或头蛋白。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述多能细胞是外胚层干细胞。

5.如权利要求1所述的方法，其中从所述多能细胞的培养得到的细胞的至少75％或更多是神经外胚层细胞。

6.如权利要求5所述的方法，其中从所述多能细胞的培养得到的细胞的至少90％或更多是神经外胚层细胞。

7.一种产生哺乳动物模式的神经外胚层的方法，所述方法包括：提供多能细胞；通过在激活素-nodal通路的一种或多种抑制剂和骨形态发生蛋白通路的一种或多种抑制剂存在下培养所述多能细胞来诱导所述多能细胞发育成神经外胚层；以及通过在音猬因子、视黄酸和头蛋白中的一种或多种存在下培养所述神经外胚层来诱导模式的神经外胚层的发育。

8.一种产生哺乳动物少突神经胶质祖细胞的方法，所述方法包括：提供多能细胞；通过在激活素-nodal通路的一种或多种抑制剂和骨形态发生蛋白通路的一种或多种抑制剂存在下培养所述多能细胞来诱导所述多能细胞发育成神经外胚层；通过在音猬因子、视黄酸和头蛋白中的一种或多种的存在下培养所述神经外胚层来诱导模式的神经外胚层的发育；以及通过在成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子和音猬因子中的一种或多种存在下培养所述模式的神经外胚层细胞来诱导少突神经胶质祖细胞的发育。

9.如权利要求8所述的方法，其中成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子和音猬因子中的两种或更多种用于所述模式的神经外胚层细胞的培养。

10.如权利要求9所述的方法，其中成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子和音猬因子用于所述模式的神经外胚层细胞的培养。

11.如权利要求8所述的方法，其中所述成纤维细胞生长因子是FGF2，所述血小板衍生生长因子是PDGF-AA。

12.如权利要求8所述的方法，其中视黄酸、音猬因子和头蛋白中的两种用于所述神经外胚层细胞的培养。

13.如权利要求8所述的方法，其中视黄酸、音猬因子和头蛋白用于所述神经外胚层细胞的培养。

14.如权利要求8所述的方法，其中从所述模式的神经外胚层细胞的培养得到的细胞的至少75％或更多是少突神经胶质祖细胞。

15.如权利要求14所述的方法，其中从所述模式的神经外胚层细胞的培养得到的细胞的至少90％或更多是少突神经胶质祖细胞。

16.如权利要求15所述的方法，其中从所述模式的神经外胚层细胞的培养得到的细胞的至少95％或更多是少突神经胶质祖细胞。

17.如权利要求16所述的方法，其中从所述模式的神经外胚层细胞的培养得到的至少99％或更多的细胞是少突神经胶质祖细胞。

18.如权利要求8所述的方法，其中所述激活素-nodal通路的一种或多种抑制剂是SB431542。

19.如权利要求8所述的方法，其中所述骨形态发生蛋白通路的一种或多种抑制剂选自dorsomorphin、LDN-193189或头蛋白。

20.一种组合物，所述组合物含有根据权利要求8产生的少突神经胶质祖细胞。

21.如权利要求20所述的组合物，还含有神经元或神经元前体。

22.一种研究工具，所述研究工具含有根据权利要求8产生的少突神经胶质祖细胞。

23.一种诊断工具，所述诊断工具含有根据权利要求8产生的少突神经胶质祖细胞。