[发明专利]环境中来自生物的过敏原的测定方法和来自生物的过敏原简易测定试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及环境中的来自生物的过敏原的测定方法和来自生物的过敏原简易测定试剂盒。

背景技术

已知在室内等环境中，存在螨、花粉等，这些成为过敏原，引起特应性皮炎等过敏疾病。对这样的过敏疾病，尽量避免与过敏原的接触，减轻过敏反应很重要。因此，提出了例如用于从室内环境中除去过敏原，防止过敏原侵入室内环境的各种对策，但是，为了起到能够避免与过敏原接触的程度的效果，需要确认过敏原在室内环境中以何种程度存在。

目前，过敏原的测定通过使用以作为测定对象的过敏原作为对应抗原的抗体的免疫测定法来进行（专利文献1～5）。但是，免疫测定法使用的抗体，特别是为了提高测定精度所使用的单克隆抗体价格高，而且必须经过复杂的工序，因此谋求能够简便并且低价地测定过敏原的测定方法和测定试剂盒。

作为其改善策略，近年来，提出了几种不使用抗过敏原抗体而测定环境中的过敏原量的方法（专利文献6、7）。这些方法中，采用着眼于过敏原中包含的蛋白酶活性，使用通过该蛋白酶的酶反应切断特定的键引起颜色变化的底物进行测定的方法。

但是，这些方法中，与免疫测定法相比，虽然能够实现一定程度简便测定过敏原，但是作为与蛋白酶反应的结果，需要新合成与发色的色素结合的特殊底物，在成本等方面尚存在问题。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开平9-87298号公报

专利文献2：日本特开平5-207892号公报

专利文献3：日本特开平11-14511号公报

专利文献4：日本特开2000-35428号公报

专利文献5：日本特开平6-34518号公报

专利文献6：日本特开2006-345801号公报

专利文献7：日本特开2008-29337号公报

发明内容

发明所要解决的课题

鉴于上述课题，本发明的目的在于，提供一种不使用抗过敏原抗体和特殊的底物，能够简便且廉价地测定环境中的来自生物的过敏原量的来自生物的过敏原的测定方法，以及用于实施该方法的来自生物的过敏原简易定量试剂盒。

用于解决课题的方法

本发明的发明者们经过了深入研究，其结果发现能够通过包含环境中来自生物的过敏原所具有的蛋白酶的底物的水溶性凝胶或水溶液，对过敏原所具有的蛋白酶的底物的作用，上述水溶性凝胶或者上述水溶液的物性发生变化，对于该物性变化进行定量化，由此完成了本发明。

即，本发明的要点如下。

本发明的第一方面涉及一种来自生物的过敏原的测定方法，其特征在于，使被检测物与包含环境中的来自生物的过敏原所具有的蛋白酶的底物的水溶性凝胶或水溶液接触，对于因上述被检测物所包含的上述蛋白酶对上述底物的作用而产生的上述水溶性凝胶状或者上述水溶液的物性变化进行定量化，由此测定环境中的来自生物的过敏原量。

本发明中，上述物性变化为上述水溶性凝胶的液化，可以通过对于由该液化而产生部分的重量或者体积进行定量或者半定量化，测定环境中的来自生物的过敏原量。这种情况下，上述水溶性凝胶优选含有在室温凝胶化的蛋白质。

此外，在本发明中，上述物性变化是指上述水溶性凝胶或者上述水溶液的pH变化，可以通过对于该pH的变化进行定量化，测定环境中的来自生物的过敏量。这种情况下，上述水溶性凝胶或者上述水溶液，优选含有因上述过敏原所具有的蛋白酶的作用而pH发生变化的蛋白质。此外，上述水溶液凝胶或者上述水溶液优选包含pH指示剂。

此外，本发明优选上述底物包括来自天然物的蛋白质和/或蛋白质分解物。

而且，本发明优选上述被检测物从地板、墙壁、窗户、窗框、铺垫物、寝具类、家具类、粉尘或者室内灰尘中采取。

本发明的第二方面涉及上述来自生物的过敏原的测定方法中使用的具备上述水溶性凝胶或上述水溶液的来自生物的过敏原简易测定试剂盒。

发明的效果

根据本发明，不需要使用抗过敏原抗体，或者使用由特殊底物引起的颜色变化等作为指标，而是使用包含环境中的来自生物的过敏原所具有的蛋白酶的底物的水溶性凝胶或水溶液的物性变化作为指标，因此能够简便并且廉价地测定环境中的来自生物的过敏原量。

附图说明

图1为表示实施例1中的蛋白酶（Der f1）的浓度和水溶性凝胶（明胶凝胶）的减少量（重量基准）的关系的图。

图2为表示实施例2中的蛋白酶（Der f1）的浓度和水溶性凝胶（明胶凝胶）的减少量（体积基准）的关系的图。