[发明专利]分离非衰老心脏干细胞的方法及其用途

权利要求书

1.一种药物组合物，其包含分离的人成体心脏干细胞和药学上可接受的载体，其中所述分离的心脏干细胞是c-kit阳性的并且具有永生化DNA。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述心脏干细胞是IGF-1受体阳性的。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述心脏干细胞具有长度大于5kbp的端粒。

4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述心脏干细胞具有长度大于7kbp的端粒。

5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述心脏干细胞是p16^INK4a阴性的。

6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述心脏干细胞分离自人心肌组织。

7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述心脏干细胞在细胞培养至少一代后，在BrdU标记后是溴脱氧尿苷(BrdU)阴性的。

8.根据权利要求1所述的组合物，其中所述心脏干细胞具有至少90%的纯度。

9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述心脏干细胞具有至少95%的纯度。

10.根据权利要求1所述的组合物，其中所述心脏干细胞具有约100%的纯度。

11.一种通过给所述受试者施用根据权利要求1所述的组合物来修复有此需要的受试者的受损心肌的方法，其中受损心肌的结构和功能完整性在施用所述组合物后获得至少部分恢复。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述分离的成体心脏干细胞是自体的。

13.根据权利要求11所述的方法，其中心肌内或冠状动脉内施用所述组合物。

14.根据权利要求11所述的方法，其中所述受损心肌是心肌梗塞。

15.根据权利要求11所述的方法，其中在给所述受试者施用之前，将所述心脏干细胞暴露于一种或多种细胞因子。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述一种或多种细胞因子是胰岛素-样生长因子I和/或肝细胞生长因子。

17.一种分离具有永生化DNA的成体心脏干细胞的方法，其包括：

(a)将成体心脏干细胞暴露于DNA标记，其中所述心脏干细胞是c-kit阳性的并且分离自心肌组织；

(b)培养所述标记的心脏干细胞进行至少一次群体倍增；和

(c)选择对于DNA标记是阴性的心脏干细胞，其中所述选择的干细胞是具有永生化DNA的心脏干细胞。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述DNA标记是BrdU、氯脱氧尿苷(CldU)或碘脱氧尿苷(IdU)。

19.根据权利要求17所述的方法，其中在暴露于DNA标记之前选择所述成体心脏干细胞的一个或多个非衰老标志物。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述一个或多个非衰老标志物选自长端粒、高端粒酶活性、GF-1受体表达和p16^INK4a表达阴性。

21.根据权利要求17所述的方法，其中所述成体心脏干细胞是人的。

22.根据权利要求17所述的方法，其还包括分离对于所述DNA标记是阴性的心脏干细胞。

23.一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和按照根据权利要求17所述的方法分离的成体心脏干细胞。

24.一种大体上纯的成体心脏干细胞群体，其是c-kit阳性的、IGF-1受体阳性的、p16^INK4a阴性的，并且具有永生化DNA。

25.根据权利要求24所述的细胞群体，其中所述成体心脏干细胞是人的。