[发明专利]质量分析装置、分析法和校准试样

说明书

技术领域

本发明涉及在质量分析装置中用于将分析对象物定量的分析法和质量分析装置。

背景技术

在进行分析对象物的定量分析时，通常需要分别测定2点以上的浓度不同的分析对象物，并从该结果根据信号强度与浓度的关系制成标准曲线。有必要根据质量分析装置的稳定性，按每数小时、每天、或每个分析对象物来制成标准曲线。

为了提高标准曲线的精度，通常使用3点以上的浓度点来制成标准曲线。这是因为，从检测器的饱和度(saturation)、测定的不均等理由出发，标准曲线有不成直线的情形。

在光学测量中，为了分析对象物的定量而制成标准曲线时，同一物质由于在同一波长中被检测出，因而不可能同时测量多浓度，需要分别测定浓度不同的分析对象物、并制成标准曲线。在光学测量的生化检验中，通常使用可校正多项目的分析对象物的多功能校准器(Multi-Calibrator)，但其为相互不干涉的分析对象物之间在每1浓度点混合得到的试样，并非是含有多浓度点的同一物质的试样。

另一方面，在本发明中使用的质量分析装置中，在为了分析对象物的定量而精度良好地制成标准曲线时，也需要分别测定至少2点以上的浓度不同的分析对象物，并从该测定结果根据信号强度和浓度的关系制成标准曲线。

在通常的质量分析法中，将分析对象物离子化后，将所生成的各种离子放入质量分析装置，按离子的质量数与电荷之比即质量与电荷之比(m/z)的各值，来决定离子的测定强度。由该结果得到的质谱(mass spectrum)数据包括所测定的离子的测定强度相对于各质量与电荷之比的峰。即，若为质量不同的物质，则在质量分析装置中可同时检测出。

进而，在如生物体试样那样含较多夹杂成分的试样的分析中，在欲将分析对象物识别成其代谢物等类似构造分子时，可使用串联质谱法(tandem mass spectrometry)(MS/MS法)。该MS/MS法测定生成离子(产物离子)，该生成离子是使由所导入的试样生成的多种离子当中的特定的测定对象成分的离子在分析装置内与气体等碰撞、使其解离而产生的。通过该MS/MS法，可进行类似构造成分之间的高精度识别。即，可仅测定与测定对象物具有类似构造的、排除了不想测定的夹杂成分的测定对象物。由此，即便是与测定对象物离子的质量数相同的夹杂成分离子，若产物离子不同，则也可识别测定对象物离子。

质量分析装置中，在欲准确定量分析对象物时，通常使用同位素标记的分析对象物的稳定同位素化合物、或化学物理性质类似的化合物(以下，称为相似体化合物)作为内标物质。作为内标物质，选择对质量分析装置的响应与分析对象物类似、且可与分析对象物分别测定的稳定同位素化合物和相似体化合物。

即，在质量分析装置中测定时，分析对象物及其稳定同位素化合物、相似体化合物的峰强度的变化表现同样的变化，在发生某些主要原因、例如夹杂成分所致的峰强度的减少或离子化效率降低等的情形中，峰面积的增减表现与分析对象物同样的增减。这里，在检测出产物离子时，所使用的稳定同位素化合物必须是产物离子中所含的元素被同位素标记化了的化合物。

即，在质量分析装置中为了分析对象物的定量而精度良好地制成标准曲线时，有必要在不同浓度点上准备2点以上将分析对象物与内标物质混合而成的溶液、并至少测定2次以上。

在如此精度良好地制成标准曲线时，必须准备多种浓度不同的分析对象物、并进行至少2次以上的分析，该准备和分析这些试样是需要工夫和时间的。此外，在进行多种定量用校准物的制备、测定等时，有可能产生认为的人为的失误。

为此，在日本特开平5-79984号公报(专利文献1)中，为了实现分析的效率化，使用所准备的1个高浓度定量用校准物，根据需要进行数次或反复进行自动稀释来测定，从而减少准备多种标准溶液的工夫和人为的失误。

此外，作为使用了稳定同位素化合物的分析法，有日本特开2000-65797号公报(专利文献2)，通过利用分析对象物自身中所含的天然同位素比来测定分析对象物，从而制成标准曲线。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开平5-79984号公报

专利文献2：日本特开2000-65797号公报

发明内容

发明要解决的技术问题

然而，专利文献1中必须进行多次测定，难以实现测定时间的迅速化。

此外，专利文献2的方法中，由于使用天然存在的元素的同位素比，所以存在难以控制标准曲线的测定浓度范围的问题。