[发明专利]通过蛋白质生物质发酵的重组微生物的生物燃料和化学生产

权利要求书

1.一种重组微生物，其特性在于相较野生型生物体有增加的酮酸流，并且包含至少一个编码酶的多核苷酸，相较野生型生物体在表达时引起更高量的化学产物生成。

2.如权利要求1所述的重组微生物，其特征在于，所述微生物包含编码脱氢酶、转氨酶、和/或脱氨酶的异源多核苷酸。

3.如权利要求2所述的重组微生物，其特征在于，所述脱氢酶选自谷氨酸盐脱氢酶(E.C.1.4.1.2和E.C.1.4.1.4)、谷氨酸脱氢酶(E.C.1.4.1.3)、缬氨酸脱氢酶(E.C.1.4.1.8)、亮氨酸脱氢酶(E.C.1.4.1.9)和苯丙氨酸脱氢酶(E.C.1.4.1.20)。

4.如权利要求3所述的重组微生物，其特征在于，所述亮氨酸脱氢酶是LeuDH。

5.如权利要求4所述的重组微生物，其特征在于，所述亮氨酸脱氢酶LeuDH来自中间型嗜热放线菌。

6.如权利要求2所述的重组微生物，其特征在于，所述脱氨酶选自下组：天冬氨酸解氨酶(4.3.1.1)、L-丝氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.17)、D-丝氨酸解氨酶(4.3.1.18)、苏氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.19)、酪氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.23)、苯丙氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.24)、和苯丙氨酸/酪氨酸解氨酶(E.C.4.3.1.25)。

7.如权利要求6所述的重组微生物，其特征在于，所述脱氨酶是丝氨酸脱氨酶SdaB。

8.如权利要求7所述的重组微生物，其特征在于，所述丝氨酸脱氨酶SdaB来自大肠杆菌、玫瑰杆菌、白喉棒状杆菌、肠道沙门氏菌、小肠结肠炎耶尔森菌、或鼻疽伯克霍尔德氏菌。

9.如权利要求2所述的重组微生物，其特征在于，所述转氨酶是L-α-转氨酶(E.C.2.6.1.X，其中X是任意数字)。

10.如权利要求9所述的重组微生物，其特征在于，所述L-α-转氨酶选自L-天冬氨酸转氨酶(E.C.2.6.1.1)、L-丙氨酸转氨酶(E.C.2.6.1.12和E.C.2.6.1.47)、L-天冬酰胺转氨酶(E.C.2.6.1.14)、和甘氨酸转氨酶(E.C.2.6.1.35)。

11.如权利要求10所述的重组微生物，其特征在于，所述L-天冬酰胺转氨酶是AvtA。

12.如权利要求11所述的重组微生物，其特征在于，所述AvtA来自大肠杆菌、脑膜炎奈瑟球菌、菠萝泛菌、地中海拟无枝菌酸菌、曼海姆产琥珀酸菌、肠道沙门菌、或鼠疫耶尔森菌。

13.如权利要求2-12中任一项所述的重组微生物，其特征在于，所述微生物的特征还在于是与野生型生物体相比时降低的氨再摄取活性、降低的2型自诱导物再摄取活性、降低的谷氨酸脱氢酶活性、降低的谷氨酰胺合成酶活性、降低的谷氨酸合成酶活性、降低的群体感应基因活性、和/或降低的整体调节剂活性。

14.如权利要求13所述的重组微生物，其特征在于，所述降低的群体感应活性来自基因luxS或lsrA表达或功能的缺失或降低。

15.如权利要求13所述的重组微生物，其特征在于，所述降低的氨再摄取活性来自基因gdhA或glnA表达或功能的缺失或降低。

16.如权利要求13所述的重组微生物，其特征在于，所述降低的整体调节剂活性来自基因CRP、LRP、Fis和/或IHF表达或功能的缺失或降低。